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yanfeier金虫 (小有名气)
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[求助]
蛋白复性
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 【分子生物】EPI帖 |
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terry130
木虫 (正式写手)
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3楼2011-06-10 07:32:38
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): Good！ 2011-06-09 23:22:13
yanfeier(金币+5): 2011-06-10 12:53:41
西瓜(金币+5, EPI+1): Good！ 2011-06-09 23:22:13
yanfeier(金币+5): 2011-06-10 12:53:41
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提供两个方法： 1， denature蛋白用透析袋除去尿素或者盐酸胍，比较费时间！ 2，超滤柱离心除去变性剂！ 如果以上两种方法都没有经验，我说一下我的方法（已成功）如果是PET原核表达系统，建议改变iptg诱导温度（如37度降到28度），有许多蛋白是可以表达在经过native裂解上清里面的（非包涵体的不变性），然后不加变性剂纯化就行了！ 再补充一点，现在很多蛋白纯化试剂盒一开始的步骤都除去变性剂了，到最后回收的蛋白基本都是复性好的！ 以上几点楼主择优选择吧！ |
2楼2011-06-09 21:26:44
