| 查看: 558 | 回复: 2 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
yanfeier金虫 (小有名气)
|
[求助]
蛋白复性
|
||
| 各位有没有在做蛋白质复性的？讨教 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有199人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
terry130
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 0 (幼儿园)
- 贵宾: 0.001
- 金币: 2283.9
- 散金: 19
- 红花: 9
- 帖子: 388
- 在线: 39.3小时
- 虫号: 313316
- 注册: 2007-02-24
- 性别: GG
- 专业: 细胞死亡
3楼2011-06-10 07:32:38
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): Good！ 2011-06-09 23:22:13
yanfeier(金币+5): 2011-06-10 12:53:41
西瓜(金币+5, EPI+1): Good！ 2011-06-09 23:22:13
yanfeier(金币+5): 2011-06-10 12:53:41
|
提供两个方法： 1， denature蛋白用透析袋除去尿素或者盐酸胍，比较费时间！ 2，超滤柱离心除去变性剂！ 如果以上两种方法都没有经验，我说一下我的方法（已成功）如果是PET原核表达系统，建议改变iptg诱导温度（如37度降到28度），有许多蛋白是可以表达在经过native裂解上清里面的（非包涵体的不变性），然后不加变性剂纯化就行了！ 再补充一点，现在很多蛋白纯化试剂盒一开始的步骤都除去变性剂了，到最后回收的蛋白基本都是复性好的！ 以上几点楼主择优选择吧！ |
2楼2011-06-09 21:26:44