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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 基因工程菌 诱导表达
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鬼豆虫

木虫 (正式写手)

[求助] 基因工程菌 诱导表达

拿到一株基因工程菌，按照一般的细菌培养方法培养后却没有得到目标蛋白。是否是因为缺少诱导剂？ 基因工程菌培养都需要诱导剂吗？
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君子见机，达人知命
1楼 2011-06-09 14:28:56
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
不诱导产量是会低的
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-06-09 15:43:59
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刘怀

金虫 (正式写手)

品质工程师

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5): 谢谢交流哈~ 2011-06-09 21:30:39
鬼豆虫(金币+1): 2011-07-06 08:47:54
鬼豆虫(金币+1): 2011-07-06 08:50:37
鬼豆虫(金币+1): 2011-07-06 08:51:16
基因工程菌的培养不一定需要加入诱导剂，有时工程菌在生长过程中会产生所需的诱导剂。你所说的工程菌未得到所需要的蛋白质，并不是它未表达所需的蛋白质，可能是在细菌培养过程中所生产出的蛋白质以细菌所需的原料被细菌所消耗。另外，细菌在培养过程中会产生一些抑制目标蛋白质表达的激素，使目标蛋白不能表达，得不到所需蛋白质。
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努力就有回报
3楼2011-06-09 19:39:05
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lly198784

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-06-12 22:09:19
鬼豆虫(金币+1): 2011-07-06 08:48:12
要根据你的表达质粒的启动子决定用什么诱导剂诱导表达，有些不加诱导剂很难表达的。
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4楼2011-06-10 11:49:01
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wang_xju

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-06-12 22:09:23
鬼豆虫(金币+1): 2011-07-06 08:48:23
既然从别人那拿来的要先确认菌株本身是好的吧，然后在解决表达问题。不知你的是大肠杆菌，还是酵母，还是其他的菌？
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5楼2011-06-10 12:13:07
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-06-12 22:09:29
鬼豆虫(金币+1): 2011-07-06 08:48:40
既然是从别人那拿到的菌种，还是应该确认一下用不用诱导剂，有些蛋白是不需要诱导剂诱导的，可以使温度控制的，诱导剂浓度过低也会不产生蛋白！
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I am not a hero , but I served with heroes！
6楼2011-06-11 21:41:00
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

鬼豆虫(金币+1): 2011-07-06 08:48:48
你要提供更详细一点的信息呀
比如说：宿主菌名称，质粒类型或名称（知道了这个就会了解很多有用的信息了）
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7楼2011-06-11 22:41:04
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-06-12 22:09:34
鬼豆虫(金币+2): 2011-07-06 08:49:20
按质粒存在形式可分两类，一、质粒以整合到基因组的形式存在，这种情况不需要考滤培养过程中质粒丢失的问题；二、质粒以游离形式存在，这种情况要考滤培养过程中质粒的丢失问题（也即传代过程中质粒拷贝数减少），一般转化后的平板4度放置一个月是没有太大的问题的（前提是平板所用的培养基不能有诱导成份存在）；
按转录的启动方式也可分两类，一、组成形表达，即在菌体扩增时蛋白已经开始表达，不需要添加诱导剂，这种类型有一个缺点是无法高密度培养，即一般单位体积收获目标蛋白的量不多；二、诱导型表达，这种形式只有在加了某种诱导剂后蛋白才开始表达，可以高密度培养，单位体积收获目标蛋白的量多。
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8楼2011-06-11 23:01:02
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newtime007

木虫 (正式写手)

成长的微生物

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-06-12 22:09:39
鬼豆虫(金币+1): 2011-07-06 08:49:41
一般需要诱导剂诱导，毕竟他是打破了自身代谢平衡，不诱导不产生目标物属正常。还有一种情况重组菌体活性减弱
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上善若水，水善利万物而不争
9楼2011-06-12 08:17:44
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