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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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睡着数绵羊

银虫 (小有名气)

[求助] 巢式PCR

最近一直在用巢式P可是做了很久就没有结果,想请教下,用巢式P要注意些什么
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睡着数绵羊

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by juliana_zou11 at 2011-06-07 14:49:23:
taq plus mix        这个是?taq和dNTP呢?

这个是种混合酶,里面都是加好的,整个体系只要加模板和引物就可以了。
7楼2011-06-08 09:12:47
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查看全部 18 个回答

juliana_zou11

木虫 (著名写手)

巢式很好做啊,是怎么没有结果呢
2楼2011-06-07 14:22:56
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睡着数绵羊

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by juliana_zou11 at 2011-06-07 14:22:56:
巢式很好做啊,是怎么没有结果呢

摸了很多梯度,可第2轮就是不出结果,是为什么那?要注意些什么,是我做的温度不合适吗?
3楼2011-06-07 14:29:35
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juliana_zou11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
睡着数绵羊(金币+1): 2011-06-07 14:43:56
lstt09nk(金币+2): 感谢参与,欢迎再来 2011-06-12 19:18:07
以下仅供参考:
1.第一轮产物电泳确定下是不是目的的
2.第二轮引物确定有没有出问题
3.PCR体系是什么样的,有没有出什么问题,如果前面两个都没问题,这里肯定需要优化,温度不能决定一切
4.实在不行用个梯度PCR试试
5.第一轮产物纯化一下再做第二轮试试
4楼2011-06-07 14:36:22
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