24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 740  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

睡着数绵羊

银虫 (小有名气)

[求助] 巢式PCR

最近一直在用巢式P可是做了很久就没有结果,想请教下,用巢式P要注意些什么
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

睡着数绵羊

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by juliana_zou11 at 2011-06-07 14:36:22:
以下仅供参考:
1.第一轮产物电泳确定下是不是目的的
2.第二轮引物确定有没有出问题
3.PCR体系是什么样的,有没有出什么问题,如果前面两个都没问题,这里肯定需要优化,温度不能决定一切
4.实在不行用个梯度 ...

1,前面几次做的时候第一轮出了非特异性条带,紧接着做第2轮,温度也条了很多,还是没有结果,后面就是重复第1轮的条件,杂带也不出了。
2,反应体系:
taq plus mix        25
pri.mix(10μM)     1.8
template(700ng/μl)    1.8
h2o                  21.4
total                 50
差不多所有温度都做了。
5楼2011-06-07 14:43:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

juliana_zou11

木虫 (著名写手)

巢式很好做啊,是怎么没有结果呢
2楼2011-06-07 14:22:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

睡着数绵羊

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by juliana_zou11 at 2011-06-07 14:22:56:
巢式很好做啊,是怎么没有结果呢

摸了很多梯度,可第2轮就是不出结果,是为什么那?要注意些什么,是我做的温度不合适吗?
3楼2011-06-07 14:29:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

juliana_zou11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
睡着数绵羊(金币+1): 2011-06-07 14:43:56
lstt09nk(金币+2): 感谢参与,欢迎再来 2011-06-12 19:18:07
以下仅供参考:
1.第一轮产物电泳确定下是不是目的的
2.第二轮引物确定有没有出问题
3.PCR体系是什么样的,有没有出什么问题,如果前面两个都没问题,这里肯定需要优化,温度不能决定一切
4.实在不行用个梯度PCR试试
5.第一轮产物纯化一下再做第二轮试试
4楼2011-06-07 14:36:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂0702 +3 梅子味晚霞 2026-03-28 3/150 2026-04-02 10:10 by jp9609
[考研] 11408 321分求调剂 +3 huchun12138 2026-03-30 4/200 2026-04-01 22:48 by guanxin1001
[考研] 342求调剂 +12 Mary Keen 2026-03-28 13/650 2026-04-01 21:02 by 流情牧豪
[考研] 310分求调剂 +4 成功上岸wang 2026-04-01 4/200 2026-04-01 20:35 by liu823948201
[考研] 286求调剂 +5 Sa67890. 2026-04-01 7/350 2026-04-01 19:50 by 6781022
[考研] 085600,320分求调剂 +5 大馋小子 2026-04-01 6/300 2026-04-01 19:40 by 唐沐儿
[考研] 291求调剂 +3 迷蒙木木 2026-04-01 4/200 2026-04-01 11:07 by 逆水乘风
[考研] 环境工程 085701,267求调剂 +15 minht 2026-03-29 16/800 2026-04-01 10:13 by li_sujuan99
[考研] 【调剂】一志愿厦大生物与医药调剂 +3 Echo虾米 2026-03-31 3/150 2026-04-01 08:40 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 3/150 2026-03-31 20:27 by 求调剂zz
[考研] 315求调剂 +6 akie... 2026-03-28 7/350 2026-03-31 16:48 by asdfzly
[考研] 287求调剂 +17 land xuxu 2026-03-26 17/850 2026-03-31 11:16 by Zzxxxs
[考研] 304材料求调剂 +5 钟llll 2026-03-26 5/250 2026-03-30 19:37 by 源_2020
[考研] 求调剂 +10 张zz111 2026-03-27 11/550 2026-03-30 09:17 by 无际的草原
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 8/400 2026-03-29 12:48 by 无际的草原
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 330一志愿中国海洋大学 化学工程 085602 有读博意愿 求调剂 +3 wywy.. 2026-03-27 4/200 2026-03-28 03:32 by fmesaito
[考研] 一志愿上海理工能源动力(085800)310分求调剂 +3 zhangmingc 2026-03-27 4/200 2026-03-27 19:01 by 给你你注意休息
信息提示
请填处理意见