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wuchuncao

金虫 (初入文坛)

[求助] 组培1/2MS培养基不凝固

琼脂7g/L,灭菌时间20或15min,温度121℃,大概有10-20%的培养基不凝,而且隔2周都不凝。
以前只加6g琼脂都没有这种情况,请大家帮忙分析下。

自己分析下可能有以下原因:
1 琼脂质量出现问题
2 灭菌时间
3 大量元素过期(去年5月的)
4 灭菌后应趁热(未凝)取出或隔天(已凝)取出
………………
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除了努力,还是努力!!!
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hzau2000zht

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2394180楼: Originally posted by 曾经遥远 at 2012-04-27 20:11:55
我前几天配培养基也出现问题了, 就是灭菌后培养基上面是不凝的,下面却凝得很硬.如果说是混合不均匀,可是煮的时候一直在搅拌了,再说灭菌的时候高温沸腾也会均匀了吧. pH值也调了,我猜测是培养基灭菌后那个瓶子瓶盖 ...

不光是煮的时候要搅拌,分装培养基的时候也要不停搅拌。从你的情况分析:放在上面的培养基应该是最先分装的培养基,而放在下面的培养基应该是最晚分装的培养基。如果分装培养基时不注意搅拌,最晚分装的培养基就越稠,也就是琼脂越多。而最早分装的培养基琼脂是不够的,所以就造成上面的不凝,而下面的很硬。至于你说的有没有可能是水蒸气进去稀释,就要看你是否真的观察到培养基灭菌前后的体积有明显差异了。
17楼2012-10-04 14:45:44
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79875441

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
jhu132llh(金币+2): good 2011-06-07 15:49:19
wuchuncao(金币+5): 2011-06-08 21:34:25
PH调的比较低,就不凝。。。好好调一下PH、、、很重要的。。
2楼2011-06-07 10:48:27
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419249049

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
jhu132llh(金币+2): 有道理哇 2011-06-07 18:46:05
我也前段时间我也遇到了同楼主同样的问题。关键问题就是楼主的ph值绝对没有调好,楼主应该用的试纸调的吧?ph值肯定偏酸了,多加一点氢氧化钠就好了,调到5.8左右ok
4楼2011-06-07 17:58:16
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apheyh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
咸鱼(金币+3): 鼓励新虫发帖应助~ 2011-06-07 21:19:04
以前这种情况,我也遇到过。以上各位说的也都是最可能的原因,但有一次,我把这种不容的培养基用微波炉加热,然后冷却后就凝固了,我也不知道什么原因,有可能是 PH 不均匀??简易楼主 也试试!
5楼2011-06-07 20:46:06
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