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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 组培1/2MS培养基不凝固
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wuchuncao

金虫 (初入文坛)

[求助] 组培1/2MS培养基不凝固

琼脂7g/L，灭菌时间20或15min，温度121℃，大概有10-20%的培养基不凝，而且隔2周都不凝。
以前只加6g琼脂都没有这种情况，请大家帮忙分析下。

自己分析下可能有以下原因：
1 琼脂质量出现问题
2 灭菌时间
3 大量元素过期（去年5月的）
4 灭菌后应趁热（未凝）取出或隔天（已凝）取出
………………
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除了努力，还是努力！！！
1楼 2011-06-07 10:16:09
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hzau2000zht

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2394180楼: Originally posted by 曾经遥远 at 2012-04-27 20:11:55
我前几天配培养基也出现问题了， 就是灭菌后培养基上面是不凝的,下面却凝得很硬.如果说是混合不均匀,可是煮的时候一直在搅拌了，再说灭菌的时候高温沸腾也会均匀了吧. pH值也调了,我猜测是培养基灭菌后那个瓶子瓶盖 ...

不光是煮的时候要搅拌，分装培养基的时候也要不停搅拌。从你的情况分析：放在上面的培养基应该是最先分装的培养基，而放在下面的培养基应该是最晚分装的培养基。如果分装培养基时不注意搅拌，最晚分装的培养基就越稠，也就是琼脂越多。而最早分装的培养基琼脂是不够的，所以就造成上面的不凝，而下面的很硬。至于你说的有没有可能是水蒸气进去稀释，就要看你是否真的观察到培养基灭菌前后的体积有明显差异了。
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17楼2012-10-04 14:45:44
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79875441

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
jhu132llh(金币+2): good 2011-06-07 15:49:19
wuchuncao(金币+5): 2011-06-08 21:34:25
PH调的比较低，就不凝。。。好好调一下PH、、、很重要的。。
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2楼2011-06-07 10:48:27
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419249049

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
jhu132llh(金币+2): 有道理哇 2011-06-07 18:46:05
我也前段时间我也遇到了同楼主同样的问题。关键问题就是楼主的ph值绝对没有调好，楼主应该用的试纸调的吧？ph值肯定偏酸了，多加一点氢氧化钠就好了，调到5.8左右ok
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4楼2011-06-07 17:58:16
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apheyh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
咸鱼(金币+3): 鼓励新虫发帖应助~ 2011-06-07 21:19:04
以前这种情况，我也遇到过。以上各位说的也都是最可能的原因，但有一次，我把这种不容的培养基用微波炉加热，然后冷却后就凝固了，我也不知道什么原因，有可能是 PH 不均匀？？简易楼主 也试试！
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5楼2011-06-07 20:46:06
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