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临风7071

木虫 (正式写手)

[求助] pcr末端加A

各位,我用高保真的酶pcr,产物无A,先要加A,请问,我纯化后的pcr产物,加taq+dATP+Buffer,那么我需要加MgCl2吗?
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amilie030312

金虫 (正式写手)

如果Buffer中不带Mg离子的产品包装中肯定会给你带一管Mg离子单独加的。
7楼2011-06-08 12:29:52
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hxinzheng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-06-06 21:27:29
临风7071(金币+1): 2011-06-07 19:05:48
看用什么taq酶,看taq酶buffer中有没有加过Mgcl2,我们一般用rtaq,有时也用Extaq,buffer中都有Mgcl2
2楼2011-06-06 21:08:47
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terry130

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

临风7071(金币+1): 2011-06-07 19:05:52
taq酶买来的时候不是都带了buffer了吗?就用人家带的就好了。 跟做PCR几乎一样,就是反应是只一步而已。反应时间尽量长点(比如1h),保证反应完全。
摒气动方息,宁神心自明。
3楼2011-06-07 08:10:10
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amilie030312

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

临风7071(金币+1): 2011-06-07 19:05:57
有的Taq给到的是Mg单独一管不在Buffer里的,所以要看买到是啥Taq酶了。
4楼2011-06-07 12:22:15
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