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30937747木虫 (小有名气)
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[求助]
[求助]cDNA的纯化方式
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| 请问cDNA有哪些纯化方式?除了试剂盒以外的.谢谢 |
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【答案】应助回帖
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rainwander(金币+3): 鼓励交流 2011-06-05 23:07:42
rainwander(EPI+1): 2011-06-05 23:07:54
30937747(金币+3): 我现在就是无法确定cDNA是单链，是否也能用无水乙醇和异丙醇沉淀。请问你能确定这样做可行吗？ 2011-06-07 07:21:40
rainwander(金币+3): 鼓励交流 2011-06-05 23:07:42
rainwander(EPI+1): 2011-06-05 23:07:54
30937747(金币+3): 我现在就是无法确定cDNA是单链，是否也能用无水乙醇和异丙醇沉淀。请问你能确定这样做可行吗？ 2011-06-07 07:21:40
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不知楼主的cDNA是否是蛋白或盐过多，一般这种情况下，除了使用市面上销售的纯化试剂盒外，最常用的方法就是一些经典的方法： 如，如果是混有蛋白，一般是用苯酚氯仿抽提后，在用纯的无水乙醇沉淀，最后用75%的乙醇清洗2次，用TE液或去离子水溶解后保存备用。 若果是含盐多的话，就可以省去苯酚抽提那一步，直接先用在用纯的无水乙醇沉淀，最后用75%的乙醇清洗2次，用TE液或去离子水溶解后保存备用。 主要在离心沉淀后，用水溶解时，不能只关心管底的那一小部分，还要记住在离心管的管壁上会粘很多样品，否则，你会损失很大cDNA. Bless you！ |
2楼2011-06-05 22:22:47
3楼2011-06-07 21:23:07
4楼2011-06-09 10:26:24
5楼2011-06-09 10:27:29