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xiaoqiang100

铁虫 (小有名气)

[求助] ELISA的结果分析及相关软件

新入行不久,对ELISA的结果分析这块不太熟悉。我们的实验是通过人源的蛋白作为抗原,兔源多克隆抗体作为一抗(我们就是为了通过做ELISA来检测其效价),然后通过辣根过氧化物作为二抗及显色组分。实验做完了,但我不知道怎么分析结果,例如标准曲线怎么做之类的。另外,我还想问一下,有没有实用的软件可用来分析。
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zyrdp

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+10): 处女帖,欢迎常来生物科学版 2011-06-14 17:28:52
silicare(EPI+1): 2011-06-14 17:45:05
xiaoqiang100(金币+2): 2011-06-14 18:13:37
你说的应该是用的间接ELISa的方法,标准品的浓度对应是多少?稀释的倍比关系是什么样子的呢?一般是用标准品的浓度和对应的OD值进行线性拟合,用EXCEL就可以达到要求,散点图,线性。浓度选X轴,OD对应Y轴 。你试下

同时有一篇文献些标曲制作,可以发给你看看
淡定
3楼2011-06-14 14:21:43
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jsk10

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+10, EPI+1): 鼓励新虫发帖交流 2011-06-20 07:56:36
间接ELISA要是试剂盒,会有标准品的,把标准品按一定浓度梯度稀释一块儿做(一般有三个重复),最后酶标仪或分光光度计比色,用软件(oringe)绘制标准曲线,的出公式,按公式将样品带入公式,
用于ELISA结果计算最方便的是logit曲线。曲线的横坐标用标样各浓度(ng/ml 或其他单位)的自然对数表示,纵坐标用各浓度显色值的logit值表示。Logit值的计算方法如下:
                      B/B0         B
    Logit(B/B0)=ln———— =ln————
                     1-B/B0      B0-B
    其中B0是0ng/ml孔的显色值,B是其它浓度的显色值。
互相帮助!
7楼2011-06-19 23:03:25
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普通回帖

xu_hai

铁杆木虫 (职业作家)

★
silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-06-14 17:28:32
没有标准品么?一般的ELISA试剂盒都有相应的标准品和样品一起做啊。至于数据有专门的软件,可惜我这台电脑没有,呵呵,要不然就上传给你了。输入数据,标准曲线自动出来,并且样品数据也都出来了。
2楼2011-06-04 14:09:27
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空谷幽兰3338

银虫 (小有名气)

我也是刚做ELISA的,我买的试剂盒上写的不让用线性拟合的方法求标准曲线,还能用什么软件分析数据啊?
4楼2011-06-14 18:35:00
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zyrdp

铁虫 (小有名气)

origin 7,还有专业的分析软件Curve Expert ,百度下
淡定
5楼2011-06-15 14:08:40
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被鄙视的人

新虫 (初入文坛)

用SPSS来进行各组数据的多重比较
6楼2011-06-16 00:10:04
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云飞暖落

新虫 (初入文坛)

我也是不清楚标准曲线怎么做。第一次买的试剂盒参考标准曲线不是线性的,是曲线。后来买不同厂家的说明书没有参考的标准曲线。不知道应该是线性还是非线性的。请高手帮忙解答一下。谢谢
8楼2012-05-17 16:25:31
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ggyydai

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
717042楼: Originally posted by xiaoqiang100 at 2011-06-04 12:31:03
新入行不久,对ELISA的结果分析这块不太熟悉。我们的实验是通过人源的蛋白作为抗原,兔源多克隆抗体作为一抗(我们就是为了通过做ELISA来检测其效价),然后通过辣根过氧化物作为二抗及显色组分。实验做完了,但我不 ...

楼主,求分享,我也在做这方面的东西,不太懂~~~谢谢
9楼2012-06-18 12:42:40
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duanxiang402

新虫 (初入文坛)

好好 不错
10楼2012-07-21 23:35:16
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