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yuxia82012

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2441502楼: Originally posted by 13808906306 at 2012-09-23 00:24:52
楼主,问个问题你制非变性聚丙烯酰胺凝胶时加甘油了吗?配方能否透露一下,最近做的emsa老不出现条带,有点抓狂

没加,按照分子克隆那本书配的
在等待中涅槃重生
11楼2012-09-23 02:32:17
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13808906306

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2441508楼: Originally posted by yuxia82012 at 2012-09-23 02:32:17
没加,按照分子克隆那本书配的...

谢谢
12楼2012-09-23 12:06:50
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fogfanlili

金虫 (正式写手)

各位大神,请教下,我也想做EMSA,才开始蛋白表达,是一个真菌的转录因子,可以用原核表达吗,如何保证有活性?谢谢了
骑牛追马
13楼2013-03-19 22:43:42
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匿名

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14楼2013-03-28 22:10:10
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匿名

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15楼2013-03-28 22:32:27
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2489098楼: Originally posted by lily7a26 at 2013-03-28 09:32:27
请问楼主你的凝胶阻滞怎么做的啊?我买的碧云天的生物素标记的探针,一直都检测不出来,连自由探针都检测不到,几个月了,都是这样的结果...

我没买试剂盒,是由公司合成的带有CY5标记的引物,检测不出来你先看看人家的说明,另外还有检测的仪器
在等待中涅槃重生
16楼2013-03-29 03:21:05
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2489091楼: Originally posted by lily7a26 at 2013-03-28 09:10:10
我的也是没有条带,请问你后面怎么改进的啊?...

没有加甘油,配方就是按照分子克隆上写的配的
在等待中涅槃重生
17楼2013-03-29 03:21:43
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匿名

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18楼2013-03-29 09:00:06
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2489142楼: Originally posted by lily7a26 at 2013-03-28 20:00:06
分子克隆第三版我找了,没有找到凝胶阻滞实验的配方啊...

我说的是配非变性胶的配方
在等待中涅槃重生
19楼2013-03-30 06:15:17
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sunny猪猪

金虫 (初入文坛)

一般都是要加鲑精DNA和未标价的探针来竞争的,50倍和100倍。
20楼2013-04-14 23:41:12
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