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gel-shift蛋白结合DNA的问题
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yuxia82012
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gel-shift蛋白结合DNA的问题
最近做gelshift研究蛋白与DNA的结合,在用不同量得蛋白与DNA反应后,跑5%的非变性聚丙烯酰胺凝胶,扫图见下,这个结果看出来是结合了,但是感觉有点不正常,主要是跑完后,在同样的曝光度下,蛋白量加的多的泳道DNA信号很弱,加大曝光度后可以明显看见上面有结合,不知道这是不是有问题,怎么证明这个蛋白是特异结合这段DNA而不是随便什么DNA都能结合呢?
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1楼
2011-06-02 21:24:04
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yuxia82012
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2489142楼
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Originally posted by
lily7a26
at 2013-03-28 20:00:06
分子克隆第三版我找了,没有找到凝胶阻滞实验的配方啊...
我说的是配非变性胶的配方
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在等待中涅槃重生
19楼
2013-03-30 06:15:17
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yuxia82012
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2楼
2011-06-03 09:43:16
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我想请教一下,你的蛋白和DNA是怎么结合的?氨基羧基,还是适体结合?两者结合后,结合了蛋白的DNA跑的慢,而没有结合的跑的快,是这个原理吗?
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木虫给力!
3楼
2011-06-23 09:05:30
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yuxia82012
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西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-06-23 14:40:19
引用回帖:
Originally posted by
爱mm
at 2011-06-23 09:05:30:
我想请教一下,你的蛋白和DNA是怎么结合的?氨基羧基,还是适体结合?两者结合后,结合了蛋白的DNA跑的慢,而没有结合的跑的快,是这个原理吗?
应该是适体结合,结合后的复合体跑得慢,就是这个原理
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4楼
2011-06-23 10:40:16
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