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swqowen

金虫 (职业作家)

勋章归天

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[求助] 淀粉酶的吸光度

按照国标法做测试淀粉酶的活性，可是每次到最后的反应液加入稀释成的碘液和盐酸失活时里立马颜色变成黑紫色，吸光度根本没发测试！开始以为是酶的浓度太高（稀释100倍（后来稀释10000倍还是那样，谁做过这方面的，请教一下，是不是淀粉过期了（可溶性淀粉都是先配先做的）还是其他什么问题？

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1楼 2011-05-30 13:25:31

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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

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scelab(金币+10, EPI+1): 谢谢热心回复 2011-07-25 00:39:19
scelab(金币+10, EPI+1): 谢谢热心回复 2011-07-25 00:40:34
scelab(MicEPI-1): 系统出问题，去掉一个吧 2011-07-25 11:49:02

我提一些问题给你思考一下，你有兴趣可以做一下问题里面的相关实验。

一、淀粉酶在70度下反应是不是会失活？我有的淀粉酶最适作用温度是35度的，70度一放就失活。你试过你的淀粉酶在70度的半衰期了没？
二、 pH6.0的缓冲液才5毫升，总体积是26毫升，你测定过加进去之后pH值还是不是6.0没有？
三、酶活力的定义是国际单位还是别人自己瞎搞的单位？单位不同，酶活力数值有可能相差一千倍。
四、1毫升反应液与0.5毫升0.1M的盐酸混合之后pH值为多少？你的淀粉酶会不会失活？
五、碘液浓度多少？浓度大，就能超过Yoo法的测定范围，Yoo法只能测到0.7。