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popcosen

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 请各位高手帮帮我

我先将水层和正丁醇层上MCI分粗分段，分成了5个大段，都跑了正相板和反相板，都是一条线，没有成点性，请各位高手帮帮我，我该怎么分呀?
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1楼 2011-05-28 09:15:40
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jiangchunyong

荣誉版主 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
qinhy(金币+1): 多谢应助~ 2011-05-29 18:09:02
没有点 那就不能过正相硅胶柱  这样的情况很简单 那就过反相硅胶柱或者凝胶柱就ok了 直到可以找到点为止再过正相柱
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2楼2011-05-28 09:25:20
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
popcosen(金币+1): 上了硅胶之后肯能会死吸附很多，不过还是谢谢你！ 2011-05-29 12:42:07
qinhy(金币+1): 多谢应助~ 2011-05-29 18:09:16
我倒认为可以过硅胶粗砍，因为你的样品只过了MCI，硅胶还是能除很多色素和很好砍段效果，硅胶之后可以凝胶再除色素，凝胶能和MCI相结合除去不同的色素，再下面就是ODS砍段了，如果极性不大的话ODS之后就直接刮板上液相了，极性大的话就选好的样品直接上液相
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分离、分离
3楼2011-05-28 10:09:08
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 谢谢发言！ 2011-05-30 19:08:10
不要太在意死吸附，我们实验室做了好几个中药粉针的题，极性非常大，（估计和你的水层差不多）开始也以为不能上硅胶柱（上硅胶基本能损失一半），一直用聚酰胺、大孔树脂、凝胶、ODS反复来，但是基本上一个硕士浪费一年也分不到几个化合物，最后他们毕业前还是用了硅胶减压柱粗砍，还是分到了一些，顺利毕业了。永远不要指望你能分到你课题里所有的化合物，能分几个是几个，（至少正丁醇层上硅胶没问题，我刚跑了减压柱，效果很好）
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分离、分离
4楼2011-05-29 12:49:53
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chem_shilly

银虫 (正式写手)
qinhy:编辑内容 2011-05-30 20:25
编辑内容~

[ Last edited by qinhy on 2011-5-30 at 20:25 ]
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5楼2011-05-30 14:39:19
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popcosen

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by xiaoxiao270 at 2011-05-28 10:09:08:
我倒认为可以过硅胶粗砍，因为你的样品只过了MCI，硅胶还是能除很多色素和很好砍段效果，硅胶之后可以凝胶再除色素，凝胶能和MCI相结合除去不同的色素，再下面就是ODS砍段了，如果极性不大的话ODS之后就直接刮板上 ...

您好！谢谢你的回答，我正丁醇层上了硅胶柱，再MCI，然后LH-20，可是洗脱完之后，凝胶变红了，怎么也洗不下来？请问有没其他的方法把LH-20洗白呀？谢谢
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6楼2011-05-30 16:19:02
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by popcosen at 2011-05-30 16:19:02:
您好！谢谢你的回答，我正丁醇层上了硅胶柱，再MCI，然后LH-20，可是洗脱完之后，凝胶变红了，怎么也洗不下来？请问有没其他的方法把LH-20洗白呀？谢谢

我们一般用DMSO冲，（装根粗柱子再冲）
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分离、分离
7楼2011-05-30 19:35:56
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yymslx2010

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

popcosen(金币+1): 如果是鞣质的话，那该怎么把它洗脱下去啊？谢谢 2011-06-03 14:27:00
反相划段吧！凝胶倒出来用丙酮或异丙醇洗洗吧，再不行就只能用酸碱处理了，估计是鞣质吧！
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8楼2011-06-02 13:09:26
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yymslx2010

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

popcosen(金币+1): 那该怎么办呀？我用碱洗掉了很多东西，但柱子还是没有变白？还有其他更好的方法吗？ 2011-06-17 16:44:16
鞣质死吸附是很难洗白的，酸碱处理估计也够呛！
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9楼2011-06-05 00:19:31
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caizhengjun

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 多谢指教！ 2011-06-17 19:16:57
我也建议粗分时用硅胶柱，看不到点没关系，可能是色素的原因(硅胶能除去部分），也可能确实样品成分太多，粗分吗！先过柱，多过几次，尽量不要停柱！
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既然选择走上科研道路，就要学会坚强！
10楼2011-06-05 08:14:47
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