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良缘百合

金虫 (正式写手)

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[求助] 大家帮我看看我的DGGE图怎么了

最近DGGE条带一直是2-3条，我的样品是土壤，应该至少有一、二十条才对的，这到底是为什么啊？
求有经验的虫友帮忙分析一下啊，多谢多谢多谢……

DGGE前PCR，条带约230bp

下面是DGGE的一些条件、DGGE前PCR图片和DGGE图片：
8%gel，40%-60%的变性梯度，10%APS 80 ul、TEMED 16 ul；
25 ul样品和5 ul 6×loading buffer；
60摄氏度，75V 13h；
EB染色30min。

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爱家人爱学习爱生活

1楼 2011-05-26 17:40:30

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321225

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

8楼: Originally posted by 在雨中 at 2011-05-29 19:46:11
应该是你的胶出问题了。
LS的图，那个梯度进样器，对着我们的那一面有“this side for high density solution"的一面其实是要放”低梯度胶“，比如你的所谓40%的胶，而非60%。不要被这些文字迷惑了眼睛哦！！！

确定是这面是低浓度胶？我按高浓度灌注的，也没问题的啊，