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biofeixue木虫 (著名写手)
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DEPC水是不是每次用前都要灭一菌？
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| DEPC水是不是每次用前都要灭一菌？多少灭菌能不能破坏DEPC? |
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DEPC水不是灭菌。 开始带你试验的人没教全你吗？ DEPC即二乙基焦碳酸酯（diethylprocarbonate），可灭活各种蛋白质，是RNA酶的强抑制剂。原位杂交在杂交及其以前的各步处理中，所有液体试剂都应经DEPC处理。方法是：取市售DEPc 1ml，加入1L待处理水（蒸馏水等）中，经猛烈振摇后，于室温静止数小时，然后高压灭菌，以除去降解DEPC（DEPC分解为CO2和乙醇）。 注意：①DEPC是一种潜在的致癌物质，在操作中应尽量在通风的条件下进行，并避免接触皮肤。②含有Tris缓冲液的溶液中，不能加入DEPC DEPC处理水,是指用终浓度为0.1%DEPC处理过的的水,然后经过高温灭菌(121° 30min,一遍即可),同时也灭活了有毒性的DEPC,因为含Tris的溶液不能用含DEPC的水配制~需要灭活DEPC ( ⊙ o ⊙ )！用途是用来配制这些药品试剂、溶解RNA的。 DEPC水，是指终浓度含0.1%DEPC的水，在1000ml双蒸水中加入DEPC原液1ml，然后摇匀，静置过夜~~，用途是用来处理器皿的 DEPC处理水最后要灭菌，不是为了灭菌，是为了灭活depc，高温高压降解DEPC成co2和乙醇。所以你的问题，灭一次就够了。 ps：灭的时候你的灭菌锅有没有排气？最好不要排气，depc会排出一些来的。直接灭就行。 |
5楼2011-05-25 20:01:36
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