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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物出现杂带
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wuzuobin125

铜虫 (小有名气)
楼主，听了大侠们的意见，你的实验进行是否顺利？
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11楼2011-05-25 16:10:38
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潇乾魂

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by bbwalkman at 2011-05-25 15:09:38:
35个循环已经挺多的了，减点试试，外加看看你的水或者什么的会不会污染了，我有一次就是非特异性特别多 把灭菌水换了就没有了

水应该不会有问题，我的阳性对照，也就是最靠近maker的那个加样点，没有任何条带。
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12楼2011-05-25 17:06:03
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潇乾魂

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wuzuobin125 at 2011-05-25 16:10:38:
楼主，听了大侠们的意见，你的实验进行是否顺利？

实践是检验真理的唯一标准。先试试看。
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13楼2011-05-25 17:21:35
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

潇乾魂(金币+3): 2011-05-26 08:02:03
那就把循环数减少吧，一般25-35个差不多，你呢循环数过多也可能是造成非特异性扩增的主要原因，退火温度根据你引物的Tm值做梯度试试，祝实验顺利
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14楼2011-05-25 17:27:55
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

潇乾魂(金币+5): 我试试，谢谢 2011-05-26 08:02:35
说明你的样品中含有含有其他的能与引物结合的序列，可能是别的菌类的。把目的片段回收后当模板再扩一次应该就好多了
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
15楼2011-05-25 20:20:24
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yuyitt

新虫 (初入文坛)
额，你这里面有些有杂带有些没有。。怎么回事。
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16楼2012-05-28 22:07:40
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hhssyy88

新虫 (初入文坛)
这个什么原因呢
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17楼2013-05-18 16:49:46
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