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feixiosng51

铁虫 (小有名气)

[求助] 液相调节流动相比例问题!!谢谢!!

液相色谱出现双峰的问题

现在做的是高效液相检测磺胺类药物和甲氧苄啶,标品都是用甲醇溶解的,流动相是乙腈(A)和0.1%甲酸(B),磺胺类的药物出峰的最佳流动相比例不太一样,A:B分别是30:70,35:70,45:55,要如何设梯度,可以把他们分离开?还有个问题就是甲氧苄啶出现双峰,第一个峰是个鼓包,第二个峰型还可以,两个峰间隔大概半分钟,调节流动相比例,两个峰依旧存在,只是峰型略有变化,这是不是溶剂效应啊?要怎么克服呢?刚接触液相色谱,不太清楚,麻烦大家给点建议!不胜感激。。。
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netsking

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

保持流速, 梯度从10%A开始至50% A止, 梯度时间为20分钟试一试, 如果效果不是很好可以增加梯度时间至40min后, 再优化.
2楼2011-05-24 11:41:12
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chenzhengyi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
把梯度减缓点;楼上的方法是不错的建议,但是最终目标是你要获得满意的分离度和短的分析时间;建议去看有关液相色谱的书,里面基本上都有梯度洗涤的
有阳光的地方就会有阴影
3楼2012-04-24 21:25:13
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