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yabxxh

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+6, EPI+1): good 2011-05-14 15:27:16
...,你这个还是要补一下基础知识了,这个其实还是挺简单的。
首先,既然有穿刺菌,我觉得还是应该去摇个菌,提一下质粒,提完质粒之后做一个双酶切鉴定,然后再去测一个序(如果基因合成公司有附带测序报告的话,可以不用测序),因为基因合成行业是有一个允许的错误几率的,虽然很小,但是一旦发生那就是100%。
然后,鉴定都正确了,就可以做表达载体了,双酶切你的表达载体和含有你目的基因的质粒,回收纯化之后,用T4连接酶进行连接,转化之后进行表达载体的鉴定和测序。如果目的片段很大的话,还是要16度过夜连接比较稳妥,比价小的话就有很多连接试剂盒可以用了。
最后,鉴定正确的表达载体可以进入下一步试验。
好运。
2楼2011-05-14 14:42:50
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