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关于过柱的两个菜鸟问题
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在下是个化学方面的菜鸟，请各为XDJM不吝支招 第一、我该如何选择填料，目下的实验基本属于天然产物分离，所不同的是产物不是在植物体中，而是在培养的细胞中，一切都是未知的，我们实验室的HPLC上在一定波长下出现了几个峰，于是乎，老板就让我把这几个物质全部分离出来，同志们哪，我该怎么做呢？我想我们感兴趣的大概都是一些极性比较小的物质吧？我是选用粗分效果比较好的树脂呢，还是选用常用的硅胶呢？ 第二 、我做了两天的预实验，用TLC摸洗脱条件，初步打算是用氯仿/醇系统，可是我看书上说淋洗剂用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂，这我就不明白了，比如说我找到一个比较好的条件（氯仿：甲醇=9：1）可是淋洗的时候我该用什么浓度呢？？ 怎么个“稀释”法。 谢谢各位老大  |
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yhyh96 
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2楼2006-09-25 14:37:49
yhyh96
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cad_0
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wsshihan(金币+1):感谢参与！
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你为过柱子老是分离不好发过愁吗？ 我的方法尽管慢了一点，但效果不错！你也试一试！我也来个抛砖引玉，大家都谈一下自己的经验。 我的经验是把柱子装的很结实，看着透明状。做法如下： 先把硅胶泡在烧杯中，用待用的洗脱剂泡，用超声波超半个小时，中间看到气泡 时用玻璃棒搅一下，如果不急着用的话还可以再泡一会，看你的时间定！能泡一夜更好，这样的柱子，你不用怎么敲，就相当结实，走柱子时不要加压。 这样的结果是在Rf值在0.5时都分得开，当然也要看你的洗脱剂的极性，关于极性的问题，别人已经说得很好，我就不多说了。如果你的产物极性相当近，也分离的开，你的是天然产物或者是非常复杂的东西，你就要试一试了！ 主要针对复杂产物！ |
4楼2006-09-25 14:41:03
海角
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