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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 关于细胞的给药浓度
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qingqing0523

金虫 (小有名气)

中药小分子单抗-欢迎交流

[求助] 关于细胞的给药浓度

细胞给药浓度该如何确定，我现在做的是3T3-L1脂肪细胞，希望做细胞的有经验的虫子们帮帮忙吧，拜谢！
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God保佑我三年的博士路顺利走完ba
1楼 2011-05-11 21:05:06
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丁砣子
顶！
2楼2011-05-11 21:08:48
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pxmyz

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
xiaodu2007693(金币+1): 谢谢 2011-05-12 16:23:15
qingqing0523(金币+5): 感谢回复 2011-05-12 16:56:39
不知道楼主细胞给药是单体成分还是提取物，这要根据药物的溶解性大小来确定，用什么溶剂溶，溶解度多大，这都是在配药时考虑的问题。溶解后，可以用梯度稀释，设置五六个大区间范围的浓度，然后根据实验结果再将给药范围缩小。最后确定一个给药浓度范围。
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Ican，Ido.
3楼2011-05-12 12:27:32
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qingqing0523

金虫 (小有名气)

中药小分子单抗-欢迎交流
引用回帖:
Originally posted by pxmyz at 2011-05-12 12:27:32:
不知道楼主细胞给药是单体成分还是提取物，这要根据药物的溶解性大小来确定，用什么溶剂溶，溶解度多大，这都是在配药时考虑的问题。溶解后，可以用梯度稀释，设置五六个大区间范围的浓度，然后根据实验结果再将给 ...

我这次给药有好几个组，其中有单体药，也有汤药，还有配伍药，先就单体成分来说吧，这个单体成分细胞给药浓度完全没有可查数据，我不知道如何定浓度范围，不好随便定一个浓度去滴加到细胞上，我想知道细胞给药是否也像动物实验给药量那样有折算方法，或者取最大致死量的几分之几定为高剂量或中剂量呢。。。
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God保佑我三年的博士路顺利走完ba
4楼2011-05-12 17:03:37
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pxmyz

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

qingqing0523(金币+5): 回复有价值！ 2011-05-12 21:05:08
首先要确定你的单体成分的化学性质，是亲水的还是亲脂性的，常见的溶剂有水、醇、DMSO，一般DMSO溶解的药要稀释1000倍才能用，因为这个浓度下才能剔除溶剂本身的毒性作用。以最大溶解浓度，稀释1000倍作为最高浓度，然后依次稀释。如果药物有抑制作用，根据抑制率，采用改良寇氏法，可以算出一个IC50值，初步可以确定给药的临界点浓度。
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Ican，Ido.
5楼2011-05-12 18:48:48
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qingqing0523

金虫 (小有名气)

中药小分子单抗-欢迎交流
引用回帖:
Originally posted by pxmyz at 2011-05-12 18:48:48:
首先要确定你的单体成分的化学性质，是亲水的还是亲脂性的，常见的溶剂有水、醇、DMSO，一般DMSO溶解的药要稀释1000倍才能用，因为这个浓度下才能剔除溶剂本身的毒性作用。以最大溶解浓度，稀释1000倍作为最高浓度 ...

是亲脂性的，易溶于甲醇、乙醇、微溶于水，不溶于氯仿、石油醚。
请问最大溶解浓度怎么确定呀？
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God保佑我三年的博士路顺利走完ba
6楼2011-05-12 21:20:08
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qingqing0523

金虫 (小有名气)

中药小分子单抗-欢迎交流
引用回帖:
Originally posted by qingqing0523 at 2011-05-12 21:20:08:
是亲脂性的，易溶于甲醇、乙醇、微溶于水，不溶于氯仿、石油醚。
请问最大溶解浓度怎么确定呀？

求改良寇氏法具体操作，多谢了！
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God保佑我三年的博士路顺利走完ba
7楼2011-05-12 21:52:42
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pxmyz

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

qingqing0523(金币+2): 2011-05-16 15:48:35
改良寇式法:lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4)
Xm:lg 最大剂量
I:lg(最大剂量/相临剂量)
P:阳性反应率之和
Pm:最大阳性反应率
Pn:最小阳性反应率
举个例子：各组浓度0.1、0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001，稀释倍数为10，最大浓度为0.1，抑制率为0.95、 0.80、0.65、0.43、0.21，0.06。代入
计算公式：
Pm=0.95
Pn=0.06
P=0.95+0.80+0.65+0.43+0.21+0.06=3.1
Xm=lg0.1=-1
lgI=lg0.1/0.01=1
lgIC50=-1-1*(3.1-(3-0.95-0.06)/4)=-3.6025
IC50=0.00025
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Ican，Ido.
8楼2011-05-16 10:26:36
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qingqing0523

金虫 (小有名气)

中药小分子单抗-欢迎交流
引用回帖:
Originally posted by pxmyz at 2011-05-16 10:26:36:
改良寇式法:lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4)
Xm:lg 最大剂量
I:lg(最大剂量/相临剂量)
P:阳性反应率之和
Pm:最大阳性反应率
Pn:最小阳性反应率
举个例子：各组浓度0.1、0.01、0.001、0.0001、0.00001、0. ...

有没有软件可以帮忙计算的呢？
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God保佑我三年的博士路顺利走完ba
9楼2011-05-16 15:49:17
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shenqushen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酶标仪测试吸光值，用EXCEL就可以算出个各数值了。
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我要成为本专业中国前十名的人！
10楼2012-03-02 13:40:11
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