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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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friya0910

新虫 (正式写手)

[交流] 多糖多酚含量较高的植物提RNA 已有2人参与

有人提过多糖多酚含量高的植物体RNA吗?我现在做百合花柱的RNA提取,用了专门针对多糖多酚含量高的植物的提取试剂盒,可是最后一步溶解RNA的时候还是特别不好溶,跑胶发现孔里很亮,应该是有多糖杂质,RNA两条带还是比较完整的!这会影响我后面的反转录和PCR吗?反正现在做了几次RT-PCR,都没做出来!
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+5): 鼓励交流 2011-05-12 09:23:33
引用回帖:
Originally posted by friya0910 at 2011-05-11 19:18:39:
有人提过多糖多酚含量高的植物体RNA吗?我现在做百合花柱的RNA提取,用了专门针对多糖多酚含量高的植物的提取试剂盒,可是最后一步溶解RNA的时候还是特别不好溶,跑胶发现孔里很亮,应该是有多糖杂质,RNA两条带还 ...

RNA应该是三条带啊,你换用英俊的Trizol提提试试,公司的试剂盒有时候不可信的,还有你测每次OD值,比值是多少?应该在1.8-2.0最好。你PCR做不出来,也可能是其他因素的问题,你批的目的条带如果比较大,也是不容易得到的,你可以找一个持家基因批一下,就知道你的RNA是否可用了。祝你试验顺利!
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
2楼2011-05-12 09:09:05
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

如果是RT-PCR没做出来,你可以拿别人没问题的RNA做一下,看看能不能出来,这样排除RT-PCR试剂或操作的问题。
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
3楼2011-05-12 09:10:49
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friya0910

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 疯狂修行者 at 2011-05-12 09:09:05:
RNA应该是三条带啊,你换用英俊的Trizol提提试试,公司的试剂盒有时候不可信的,还有你测每次OD值,比值是多少?应该在1.8-2.0最好。你PCR做不出来,也可能是其他因素的问题,你批的目的条带如果比较大,也是不 ...

我的目的基因不大,500bp左右吧,我的RNA出来是三条带,但是第一条和第二条差不多亮度,关于你说的测紫外,我们实验室只有那种特别大的比色皿,用来测RNA感觉太浪费了,而且我材料有限,提的量也不多,所以一般就跑个胶判断一下质量和浓度!找了一个持家基因,整准备合成呢!
4楼2011-05-12 13:18:17
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by friya0910 at 2011-05-12 13:18:17:
我的目的基因不大,500bp左右吧,我的RNA出来是三条带,但是第一条和第二条差不多亮度,关于你说的测紫外,我们实验室只有那种特别大的比色皿,用来测RNA感觉太浪费了,而且我材料有限,提的量也不多,所 ...

有专门的微量测定的比色杯,放100微升就可以。如果常做核酸可以买一个的。
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
5楼2011-05-12 14:38:28
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friya0910

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 疯狂修行者 at 2011-05-12 14:38:28:
有专门的微量测定的比色杯,放100微升就可以。如果常做核酸可以买一个的。

好的,那个比色皿可以在一般的紫外分光光度计上用吗?
6楼2011-05-12 18:47:10
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by friya0910 at 2011-05-12 18:47:10:
好的,那个比色皿可以在一般的紫外分光光度计上用吗?

可以,就是在一般紫外分光光度计上用的。
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
7楼2011-05-13 10:08:16
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奔跑的乌拉龟

铜虫 (正式写手)

买一个nanodrop
脚踏实地
8楼2013-04-19 16:26:57
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