24小时热门版块排行榜    

查看: 3252  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wxh_0309

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于噬菌体随机肽库的一些问题,急求~

我最近在做噬菌体随即肽库的筛选,我用的是NEB的12肽库,筛选完一轮后测滴度没有蓝白斑,只是整版发蓝,不是稀释倍数低的情况,板上什么斑都没有,所有东西都重新灭菌了,不知道什么原因,谢谢,急求~
回复此楼
每天都在做实验~研究。。。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奥特小man

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hflf at 2011-05-09 14:17:12
我们是自己构建的合成库,和你们的筛选方法也不一样,只能帮顶一下了

您好,无意中看见了你的回复,真的感到很欣慰,我在做噬菌体,可一直无人请教,就想问您一下,M13KO7上层胶混合培养过夜后,它的噬斑是什么样子的,分泌型噬菌体跟裂解型是不是不一样?我一直在用TG1扩增M13KO7,PEG/Nacl沉淀后一直看不见沉淀,心里一直没底是不是就没扩出来,特此请教,不知在这留言您能不能看见,若能收到回复定不胜感激!!
12楼2014-07-25 17:53:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

hflf

金虫 (小有名气)

我们是自己构建的合成库,和你们的筛选方法也不一样,只能帮顶一下了
行到水穷处,坐看云起时!
2楼2011-05-09 14:17:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxh_0309

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by hflf at 2011-05-09 14:17:12:
我们是自己构建的合成库,和你们的筛选方法也不一样,只能帮顶一下了

你们筛后的检测滴度的方法是什么?我换别的方法也可以。。。
每天都在做实验~研究。。。
3楼2011-05-10 20:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hflf

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

wxh_0309(金币+5): 谢谢 2011-05-16 09:32:56
helper phage滴度测定用的top agarose和TG1混了helper phage倒在2*YT上,数噬菌斑;重组的phage和TG1混了倒在含氨苄的2*YT上,数单克隆。
行到水穷处,坐看云起时!
4楼2011-05-11 10:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见