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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于噬菌体随机肽库的一些问题，急求~
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wxh_0309

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于噬菌体随机肽库的一些问题，急求~

我最近在做噬菌体随即肽库的筛选，我用的是NEB的12肽库，筛选完一轮后测滴度没有蓝白斑，只是整版发蓝，不是稀释倍数低的情况，板上什么斑都没有，所有东西都重新灭菌了，不知道什么原因，谢谢，急求~
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每天都在做实验~研究。。。
1楼2011-05-08 15:17:37
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奥特小man

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hflf at 2011-05-09 14:17:12
我们是自己构建的合成库，和你们的筛选方法也不一样，只能帮顶一下了

您好，无意中看见了你的回复，真的感到很欣慰，我在做噬菌体，可一直无人请教，就想问您一下，M13KO7上层胶混合培养过夜后，它的噬斑是什么样子的，分泌型噬菌体跟裂解型是不是不一样？我一直在用TG1扩增M13KO7，PEG/Nacl沉淀后一直看不见沉淀，心里一直没底是不是就没扩出来，特此请教，不知在这留言您能不能看见，若能收到回复定不胜感激！！
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12楼2014-07-25 17:53:13
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hflf

金虫 (小有名气)
我们是自己构建的合成库，和你们的筛选方法也不一样，只能帮顶一下了
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行到水穷处，坐看云起时！
2楼2011-05-09 14:17:12
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wxh_0309

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by hflf at 2011-05-09 14:17:12:
我们是自己构建的合成库，和你们的筛选方法也不一样，只能帮顶一下了

你们筛后的检测滴度的方法是什么？我换别的方法也可以。。。
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每天都在做实验~研究。。。
3楼2011-05-10 20:58:08
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hflf

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

wxh_0309(金币+5): 谢谢 2011-05-16 09:32:56
helper phage滴度测定用的top agarose和TG1混了helper phage倒在2*YT上，数噬菌斑；重组的phage和TG1混了倒在含氨苄的2*YT上，数单克隆。
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行到水穷处，坐看云起时！
4楼2011-05-11 10:21:21
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