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cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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dhd997(金币+5, EPI+1): good 2011-05-08 16:32:50
dhd997(金币+20): 应楼主要求,追加20金币。 2011-05-16 08:59:30
小木虫: 金币+2, 帖子真精彩 2014-06-14 08:53:23
免疫共沉淀实验由于在非变性实验条件性进行,这样蛋白质之间的天然相互作用得以最大程度的保留,因此可以比较真实的反应蛋白质之间的相互作用。但也基于此点,免疫共沉淀并不能显示蛋白质之间的相互作用是直接还是间接的,因为通过目的蛋白抗体共沉淀下来的是一个蛋白复合物,而不仅仅是和目的蛋白直接相互作用的蛋白。而GST-Pull down实验可以通过体外实验条件,去除其它蛋白的影响,从而确定目的蛋白和待检测蛋白是否可以发生直接相互作用。GST亲和层析和GST Pull-down方法的基本原理是:利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋
白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)
亲和结合。因此,当与融合蛋白有相互作用的蛋白
通过层析柱时或与此固相复合物混合时就可被吸
附而分离。
2楼2011-05-08 14:08:42
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