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wkl1984金虫 (小有名气)
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如何将下面的序列连接在一起？
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下面给出上下游引物的序列和连接子序列，大家帮忙分析一下如何将这三段片段连接在一起，组成共同的一段片段？ VH上游游引物：CCT CCA CCA CTC GAG ACG ACG ACT TCA ACG CCT GG VH 下游引物：GTA TAC GCA ACT GCG GCC CAG CCG GCC ATG GCC GAG GWG AAG CTG GTG GAG TCY GG 连接子：GGT GGA GGC GGT TCA GGC GGA GGT GGT TCT GGC GGT GGC GGA TCG Vk上游引物：GAG TCA TTC TCG ACT TGC GGC CGC ACG TTT GAK YTC CAG CTT GGT CCC VK下游引物：ACC GCC TCC ACC AGT GCA CTT GCC ATY GTG CTG ACC CAG AST CC 兼并碱基代码：Y=C/T R=A/G S=C/G W=A/T K=T/G 是直接将着3段片段放在同一PCR反应体系中，按照模板对待，还是先将VK和连接子进行PCR扩增后，再与VH进行PCR拼接？该如何操作呢？扩增的引物如何选择呢？ |
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