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DoRbIr

金虫 (正式写手)

引用回帖:
1578852楼: Originally posted by xiong-y-x at 2012-09-25 16:09:27
楼主做DGGE的啊 我想问一下DGGE 能跑短的ssDNA吗 能否将不同长度的短的单链DNA分开呢

DGGE,可以跑出大小相同序列不同的差异,如果你只是长度有差异的话普通的PAGE就可以了,跑单链的话,变性PAGE就好了
11楼2013-03-24 00:48:03
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圣迭戈

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 在雨中 at 2011-05-05 12:26:30
我做过Archaea 的amoA基因的DGGE,效果很好。
细菌的amoA基因的DGGE没做过。呵呵。
Archaeal amoA genes were amplified using primers CrenamoA-23f and CrenamoA-616r without the requirement of a GC clamp.
...

请问大牛的archaeal amoA 基因DGGE上样多少微升啊?纯不纯化?
为什么不用GC夹呢?
12楼2014-06-13 16:10:20
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ycg139

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yujijiang at 2011-05-06 00:19:53
我用的引物是amoA-1F-GC和amoA-2R。。。。用的是类似巢式PCR进行两轮扩增的。
另外,我配0%和100%的母液时都会过一下milipore的0.22um滤膜,因为母液在冰箱中放置一段时间后出现絮状的沉淀。。。。是否过膜也会有影 ...

用amoA-1F-GC和amoA-2R的巢式PCR怎么进行两轮扩增,PCR的具体条件楼主能够分享一下吗呃?最近在做这对引物,有的能扩出来,有的扩不出来。
条件        95℃,5min;
        40 cycles( 95 ℃, 30 s; 55 ℃, 60s; 72 ℃, 60 s);
        72℃,5min。
13楼2016-01-25 23:17:16
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