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我很好!

新虫 (小有名气)

[求助] about tail-pcr

上次提取的DNA,做tail-pcr,有出来的条带,这次,是重新提取的DNA,是同样一批样品,但是,一个都扩不出来,第二,第三轮都是涂抹带,真不知道是咋回事了,试过用上次提的那批DNA,那批之前能扩出来,现在,也扩不出来了,BUFFER换成10X EX TAQ BUFFER  酶用TAKARA  EX TAQ 其他的也没啥了,程序的话 第一轮3个小时13分,第二轮3个半小时,第三轮好像1个半多小时,不知道哪里出问题了,求助大家
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我很好!
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zxnju0102

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by szylnl at 2011-06-24 10:34:55
我跟你有一样的问题 你说的 和我遇到的一摸一样
请问你是怎么解决的啊
谢谢

请问你解决了这个问题吗
5楼2014-11-27 09:14:44
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finejune866

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 鼓励新虫交流 2011-05-04 08:40:49
我很好!(金币+3): 最早一批的是今年1月份做的,没有了 2011-05-04 16:03:47
原因很多,但有一点确定:引物体系出现了问题。最早一批的一轮二轮产物如果还留着,就可以分别尝试,检测具体哪一轮出现了问题!
成都,再出发
2楼2011-05-04 00:17:08
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szylnl

银虫 (小有名气)

我跟你有一样的问题 你说的 和我遇到的一摸一样
请问你是怎么解决的啊
谢谢
用百分之百的努力去做每件事
3楼2011-06-24 10:34:55
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我很好!

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by finejune866 at 2011-05-04 00:17:08:
原因很多,但有一点确定:引物体系出现了问题。最早一批的一轮二轮产物如果还留着,就可以分别尝试,检测具体哪一轮出现了问题!

稀释上一轮PCR产物的浓度
我很好!
4楼2011-06-29 10:58:54
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