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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 考马斯亮蓝与凯氏定氮
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升浮降沉

金虫 (初入文坛)

[求助] 考马斯亮蓝与凯氏定氮

大家好，我用考马斯亮蓝法测样品的蛋白的含量时候发现自己测得的结果和别人用凯氏定氮法测得的结果相差三倍，这是为什么啊
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1楼2011-05-02 16:09:45
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路人甲007

木虫 (正式写手)

小七

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 确实。 2011-05-02 20:10:25
升浮降沉(金币+5): 2011-05-03 12:48:24
凯氏定氮法不准
bradford法还是比较准确的
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与人玫瑰手有余香
2楼2011-05-02 17:39:57
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j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-05-04 17:52:55
凯氏定氮能测所有含氮物质，考马斯亮蓝是与蛋白质结合显色测定，测定的物质成分复杂的话，2种方法没法比吧
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
3楼2011-05-03 11:36:21
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升浮降沉

金虫 (初入文坛)
那如果我想测个蛋白含量那应该用哪种方法好一些呢，只是想测一下那个蛋白的含量然后配饲料用的
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4楼2011-05-03 12:48:16
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j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

配饲料买纯品不就完了
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
5楼2011-05-04 08:54:22
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smiles292

铁杆木虫 (正式写手)

暂无方向

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+5): 鼓励交流 2011-05-04 17:52:34
silicare(EPI+1): 2011-05-20 18:16:52
说的不一定对，其实准不准都是一个参照，凯氏定氮法是原理可能是肽链骨架及带有氮的侧链，对侧链可能就是一个估算的平均，考马斯亮蓝呢，就是测蛋白碱性基团的，它只能和碱性基团结合。其实准不准取决于你的参照，当然，凯氏定氮法是比较早的方法，误差确实比较大些。还有考马斯亮蓝测量的时候样品不纯的话可能也会有很大的干扰，对吸收值也有一定要求，如果样品吸收值在1左右时比较准吧
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悲催莫过于让一个物化的去搞蛋白
6楼2011-05-04 10:18:36
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升浮降沉

金虫 (初入文坛)
恩，谢谢大家了
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7楼2011-05-04 17:30:57
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升浮降沉

金虫 (初入文坛)
那我测某一种物质的蛋白含量是以凯氏定氮法测量的结果作为标准还是以凯氏定氮法测量的结果为准呢
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8楼2011-05-04 17:33:44
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smiles292

铁杆木虫 (正式写手)

暂无方向
越复杂的东西越不好重复，建议采用考马斯亮蓝，用蛋白纯品做标准曲线，然后再做定量
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悲催莫过于让一个物化的去搞蛋白
9楼2011-05-04 18:37:20
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protein_

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-05-05 16:53:29
定氮是所有蛋白质的含量，考马斯亮蓝的方法是部分带疏水基团的蛋白质的含量，2个没有对比性吧。看你的需要来确定方法吧。
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10楼2011-05-04 21:58:48
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