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金虫 (初入文坛)

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[求助] 考马斯亮蓝与凯氏定氮

大家好，我用考马斯亮蓝法测样品的蛋白的含量时候发现自己测得的结果和别人用凯氏定氮法测得的结果相差三倍，这是为什么啊

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1楼2011-05-02 16:09:45

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smiles292

铁杆木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+5): 鼓励交流 2011-05-04 17:52:34
silicare(EPI+1): 2011-05-20 18:16:52

说的不一定对，其实准不准都是一个参照，凯氏定氮法是原理可能是肽链骨架及带有氮的侧链，对侧链可能就是一个估算的平均，考马斯亮蓝呢，就是测蛋白碱性基团的，它只能和碱性基团结合。其实准不准取决于你的参照，当然，凯氏定氮法是比较早的方法，误差确实比较大些。还有考马斯亮蓝测量的时候样品不纯的话可能也会有很大的干扰，对吸收值也有一定要求，如果样品吸收值在1左右时比较准吧