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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): 鼓励交流 2011-05-02 00:33:55
nick.nye-0313(金币+20): 2011-05-26 08:55:30
1.转膜时间要看你目的蛋白的大小而定,蛋白分子量越大,转膜的电压电流要更大,时间也要更长些,所以没有定值。
2.不明白你说的蛋白通路是什么意思,按我的理解,只要你通路上的蛋白有变化,并且足够显著的话,在westen-blot中是可以显示出区别的。
3.曝光时间没有一个定值,如果你的抗体特异性极强,并且你的蛋白丰度极高,比如actin一般我曝光10秒钟就足够了,如果你的单摆风度低的话就要适当延长曝光时间。
4.我这的胶,以及显影定影液都集中起来,一起处理。
5.致不致癌我不敢确定的回答,但是肯定对身体不好,需要戴手套。
6.westen-blot需要注意的事情很多,包括跑SDS-PAGE,转膜,孵育,洗涤等等,建议在论坛里找一下以前发过的流程和注意事项。
2楼2011-05-01 22:54:42
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