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mo-jiajia

木虫 (正式写手)

红领巾

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[交流] 石蜡包埋切片问题已有7人参与

请问做石蜡包埋时切的植物根总是会切碎，是不是前期石蜡浸透没做好，还是根太厚了，还是与根的质地有关系呢？石蜡切片该注意些什么问题？

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天生我才必有用！

1楼2011-04-30 17:20:26

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老梁他闺女

铁虫 (小有名气)

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包埋的前一步是透蜡。所谓透蜡，就是将包埋剂石蜡透入组织的过程。石蜡充满在全部组织中，并和细胞壁密切贴合，以便承受切片时的压力，并保持切片中各组织细胞的原来位置。石蜡的熔点在42～60℃之间。石蜡全部透入植物组织的时间约需1～2天。步骤：
将材料留在透明剂二甲苯中，将已切削好的石蜡条放在二甲苯中，让下部逐渐溶解，石蜡条渐渐下降，如此加放几次。用酒精灯微加热以促进溶解。二甲苯和石蜡体积近于1∶1时置于室温冷却，直到石蜡凝为固体。
将盛有已透入石蜡的叶片的蜡杯和4个盛有新鲜石蜡的蜡杯转移至60～60 ℃恒温箱。待石蜡熔融后，用预热过的镊子移动材料换入新鲜石蜡3次，每次停留2～4小时。到第4次换入新鲜石蜡，即可准备包埋。很可能是因为你透蜡没透好，材料里还有二甲苯，二甲苯能使材料变脆的。所以好好透蜡！