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leechy

金虫 (正式写手)

[求助] 细胞培养时用PBS冲洗细胞如何降低细胞损失

RT,
在细胞培养的时候,大家都怎样用PBS冲洗细胞的操作,尽量避免细胞的损失呢?
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

【答案】应助回帖

leechy(金币+4): 谢谢 2011-04-29 10:54:24
是的
这个是分很多种的
要是贴壁好的细胞,可以顺着壁稍微快点加,让PBS顺畅的流经所有细胞后晃动培养瓶后吸走PBS
但是对于贴壁比较弱的细胞就得顺着壁慢点加,然后慢慢的晃动培养瓶,轻轻倾斜培养瓶,保持吸管在液面表面慢慢的吸走PBS
对于悬浮细胞,直接用PBS重悬,后离心,要想细胞损失少的话,就得稍微提高一点点的离心力
青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
3楼2011-04-29 09:28:05
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schmyly

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

leechy(金币+3): 谢谢 2011-04-29 08:59:06
有些细胞如293T贴壁不牢,加液时很容易将细胞冲下来。一般是将吸管的头贴着盘臂,缓慢加入液体,不要直接冲着细胞吹,这样效果会好很多。
2楼2011-04-29 08:57:52
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tonyprague1967

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

leechy(金币+3): thanks 2011-05-01 11:00:21
我觉得,除了轻加,轻洗以外,你还可以将洗涤完的PBS液留下拉,跟消化下的细胞,一起离心,这样可以尽量减少细胞的损失。我们做凋亡,上清细胞是一点也不能弃的,所以可以借鉴下……
淡定……
4楼2011-04-30 09:37:32
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