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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 关于作液相标准曲线的若干问题
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lucky20511

木虫 (小有名气)

[求助] 关于作液相标准曲线的若干问题

我是新手，从来没做过液相的标准曲线，现在想用外标法做儿茶素的标准曲线，想请教一下各位大侠下面这些问题：
1、标准曲线要取5个点？如何取？（在木虫搜过有人说范围一般要求3个数量级，其中最高和最低浓度要包括所测样品浓度80%和120%，是这样吗？）
2、各浓度的标样的混合标样和单标要进几针？取平均值？
3、一般隔多久要重新做标准曲线？
4、看过一些文献，很多人做液相的标准曲线还会做精密度、稳定性、重复性，加样回收率试验，这些实验一定要做吗？
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1楼 2011-04-27 23:07:44
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lucky20511

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cuizy2007 at 2011-04-28 09:31:35:
1、可以按照这个规则来做标准曲线；
2、在仪器稳定的前提下，躲进几次样取平均值当然最好，不过一般3-5次足矣，如果有明显的异常值一定要去除；
3、每次试验的时候可以选取工作曲线某个点（最好中间浓度）重新进 ...

“3、每次试验的时候可以选取工作曲线某个点（最好中间浓度）重新进样，其仪器响应如果无明显变化则不用重新做，否则需要重新做”
这位大侠，请问“仪器响应如果无明显变化”具体指的是什么呢？出峰时间？峰面积？
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5楼2011-04-28 22:30:23
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cuizy2007

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

lucky20511(金币+6): 谢谢你的回复，今天问了一个做液相的老师，她说的跟你说的差不多，非常感谢！ 2011-04-28 11:23:03
1、可以按照这个规则来做标准曲线；
2、在仪器稳定的前提下，躲进几次样取平均值当然最好，不过一般3-5次足矣，如果有明显的异常值一定要去除；
3、每次试验的时候可以选取工作曲线某个点（最好中间浓度）重新进样，其仪器响应如果无明显变化则不用重新做，否则需要重新做；
4、一定要做，这些参数是方法可靠性的保证，只有这些参数满意你的数据才可信。
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2楼2011-04-28 09:31:35
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yinjiq

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

lucky20511(金币+4): 谢谢你分享的经验！我也要查查资料看具体怎么做精密度、稳定性、重复性，加样回收率试验了~ 2011-04-28 22:33:10
1 回收率是确定方法准确度的，在样品中加标，测定回收率在90%~110%即可，定量分析要求给出
2 精密度表示多次测量的符合程度，标准偏差或相对标准偏差表示。每点3~5次，大偏差数据可删除
3 最好凑齐样品，制作标准曲线，在相同测试条件下测定。如果隔天测试，需选择1~2个点测定，与标准曲线比对，无明显差异，可使用。差差异明显，需重做标准曲线。
4 外标法进样量，要严格控制。
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3楼2011-04-28 10:15:46
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lucky20511

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yinjiq at 2011-04-28 10:15:46:
1 回收率是确定方法准确度的，在样品中加标，测定回收率在90%~110%即可，定量分析要求给出
2 精密度表示多次测量的符合程度，标准偏差或相对标准偏差表示。每点3~5次，大偏差数据可删除
3 最好凑齐样品，制作标 ...

外标法进样量要严格控制，我们是手动进样的，每次进样50uL，每次进样前我都小心地把进样针活塞拉杆推到50uL刻度，不知这算不算严格呢？
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4楼2011-04-28 22:27:51
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