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hubeilj1108

铁虫 (初入文坛)

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[交流] 选择荧光定量试剂的问题

有两款试剂，同一对引物做出来产生的CT值不一样，我也知道这个是很正常，我们选择CT值小的那一款试剂好呢？还是两个都一样，结果无影响？
因为有一款A试剂我的看家基因做出来的有26左右（这个也是摸索好几次才摸索出来的最好的），相对应的目的基因有28，30，33的都有，程序设计也比较麻烦，不仅要摸索退火温度，而且退火温度的那个时间稍微改变一下产生的CT值范围从28波动到33，第一步一般是95度嘛，这个也要有时候摸索到98度（卖试剂的人说的），因为我做的基因多，这样的话岂不是要摸索很久哦。
另一款B试剂程序只需要摸索退火温度，其他的都不用摸索，产生的CT值看家基因是22左右，目的基因是23-26。
B试剂的时间比A试剂长10分钟，当然，我需要的是试剂的稳定性，这个我不在乎。二者价格相差不大。
我好崩溃啊！大家快来救救我！

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1楼 2011-04-26 19:23:14

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hubeilj1108

铁虫 (初入文坛)

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Originally posted by hubeilj1108 at 2011-04-26 19:23:14:
有两款试剂，同一对引物做出来产生的CT值不一样，我也知道这个是很正常，我们选择CT值小的那一款试剂好呢？还是两个都一样，结果无影响？
因为有一款A试剂我的看家基因做出来的有26左右（这个也是摸索好几次才 ...

你用的是IQ5吧？