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选择荧光定量试剂的问题
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hubeilj1108
铁虫
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选择荧光定量试剂的问题
有两款试剂,同一对引物做出来产生的CT值不一样,我也知道这个是很正常,我们选择CT值小的那一款试剂好呢?还是两个都一样,结果无影响?
因为有一款A试剂我的看家基因做出来的有26左右(这个也是摸索好几次才摸索出来的最好的),相对应的目的基因有28,30,33的都有,程序设计也比较麻烦,不仅要摸索退火温度,而且退火温度的那个时间稍微改变一下产生的CT值范围从28波动到33,第一步一般是95度嘛,这个也要有时候摸索到98度(卖试剂的人说的),因为我做的基因多,这样的话岂不是要摸索很久哦。
另一款B试剂程序只需要摸索退火温度,其他的都不用摸索,产生的CT值看家基因是22左右,目的基因是23-26。
B试剂的时间比A试剂长10分钟,当然,我需要的是试剂的稳定性,这个我不在乎。二者价格相差不大。
我好崩溃啊!大家快来救救我!
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2011-04-26 19:23:14
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):给个红包,谢谢回帖
我们这边是用伯乐的,还好哦,一个小时加几分钟跑一块板。
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2011-04-26 19:56:39
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hubeilj1108
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Originally posted by
hubeilj1108
at 2011-04-26 19:23:14:
有两款试剂,同一对引物做出来产生的CT值不一样,我也知道这个是很正常,我们选择CT值小的那一款试剂好呢?还是两个都一样,结果无影响?
因为有一款A试剂我的看家基因做出来的有26左右(这个也是摸索好几次才 ...
你用的是IQ5吧?
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3楼
2011-04-26 20:01:44
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zhangzhuang
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):给个红包,谢谢回帖
hubeilj1108(金币+2): 这都被你看出来了! 2011-05-05 10:13:59
hubeilj1108(金币+1): 2011-10-07 19:10:27
呵呵 是不是李师姐啊?
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5楼
2011-04-29 09:51:31
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