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todouhy

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助SDS-PAGE变性胶中巯基乙醇的相关问题

我现在做的酶蛋白以前跑过一次变性胶，大小是在60kd以下的，但是理论的蛋白分子量是在65kd，我的蛋白里面有五个cys，听说如果是加2-巯基乙醇可以变性二硫键，请问上样缓冲液的配方巯基乙醇的量是多少呢？谢谢
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1楼2011-04-26 16:46:58
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314300420

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

todouhy(金币+2): 就是我们实验室传下来的那个实验配方，呵呵 2011-06-26 09:58:37
todouhy(金币+2): 呵呵，我已经做出来了是跟理论值差不多 2011-10-30 09:42:50
引用回帖:
Originally posted by 314300420 at 2011-04-27 20:29:21:
5*上样buffer的beta-巯基乙醇含量为5%，和样品混合后含量为1%

楼主从什么资料上面找的1*含量为5%？
我参考的是《精编分子生物学实验指南》第四版，第933页，2*的SDS样品缓冲液是加2ml的beta-巯基乙醇，定容到100ml。
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4楼2011-05-08 10:33:11
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liu_juan82

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 很热心~~ 2011-04-26 22:42:46
todouhy(金币+2): 最近好忙，没有时间上来，呵呵，谢谢哈 2011-05-07 10:48:49
具体的数据我既不清楚了，你可以参考朱厚础先生翻译的著作《蛋白质纯化鉴定手册》上面有具体的数据。
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2楼2011-04-26 21:10:52
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314300420

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

todouhy(金币+2): 我看了怎么1*的就是5％终体积比呢？但是还是谢谢 2011-05-07 10:49:44
5*上样buffer的beta-巯基乙醇含量为5%，和样品混合后含量为1%
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3楼2011-04-27 20:29:21
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雯子027

金虫 (小有名气)
引用回帖:
732809楼: Originally posted by 314300420 at 2011-05-08 10:33:11
楼主从什么资料上面找的1*含量为5%？
我参考的是《精编分子生物学实验指南》第四版，第933页，2*的SDS样品缓冲液是加2ml的beta-巯基乙醇，定容到100ml。...

三楼说的是5*loading buffer里beta-巯基乙醇为5%，跟你的是一样的浓度。
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5楼2013-03-20 20:36:35
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