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lhwen182金虫 (正式写手)
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[求助]
修复PCR（reconditioning PCR）
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请教一下，修复PCR怎么做？看文献说是将先扩增出的产物稀释10倍，再在新的反应液中进行新的3个循环的修补扩增。 问：这个稀释是直接用灭过的双蒸水稀释么？稀释以后的体系又该怎么配置？50μ的体系稀释后就是500μ了，这个体系该怎么配啊？ |
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【答案】应助回帖
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西瓜(金币+5): Good! 2011-04-28 10:21:13
lhwen182(金币+5): 2011-04-29 13:48:06
lhwen182(金币+10): 2011-05-06 14:49:30
西瓜(金币+5): Good! 2011-04-28 10:21:13
lhwen182(金币+5): 2011-04-29 13:48:06
lhwen182(金币+10): 2011-05-06 14:49:30
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稀释10倍用ddH2O就可以。以稀释后的PCR产物作为模板，PCR体系同原来的体系，再用同程序PCR3个循环。 你可操作的方法是：将PCR产物取1微升，加入9微升的ddH2O，这就是你新的要进行修复PCR的模板，所有东西按照原来的体积加。比如原来DNA模板要加3微升，那么修复PCR的体系中也加入3微升DNA模板（即稀释后的PCR产物）。 不知道我又没有说清楚，若有不明白的，请留言给我哈！ |
2楼2011-04-28 09:51:43
lhwen182
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3楼2011-04-29 13:49:14
5