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蓝色柳

金虫 (小有名气)

[求助] 懂液质的进来,帮个忙,不胜感激!谢谢!

菌体发酵液,用制备液相制备之后,里面还有7、8种组分的样子,现在知道里面可能有几种有机酸或其他别的一些未知物,
(1)如果这样进液质的话,是否可以推测出这7、8种组分大致是什么吗?
(2)进液质之后,做二级、三级的话,最后是所有的碎片都混在一起了还是每个峰的碎片是分别出来的
(3)这种混合物做液质有什么意义?

请高手赐教!!不胜感激!!
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JLU_chem_man

新虫 (正式写手)

质谱蛋白质学习者

【答案】应助回帖

蓝色柳(金币+10): 谢谢,我没有做过质谱,我想知道在我这种是未知物质混合物的情况下,做液质是否可以对这里面多种组分分别定性,就是做出液质后可以大体的知道这几种组分分别是什么? 2011-04-21 18:34:33
液质联用之前,首先要做的就是单独在液相上寻找合适的条件和参数使得在液相条件下完成分离并通过液相的检测器(紫外,荧光等)分辨出组分的多少。
而液质联用,质谱在某种程度上而言,扮演着检测器的作用,即在液相上对应的保留时间,峰强最高时,也会对应相应组分的m/z,而且你可以利用串联质谱MS2将此进一步打碎,看看相应的碎片峰能否大致对应上!
努力奋斗!!!
2楼2011-04-21 18:06:33
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JLU_chem_man

新虫 (正式写手)

质谱蛋白质学习者

【答案】应助回帖

蓝色柳(金币+10): 2011-04-22 14:36:44
(1)这个利用液相保留时间和质谱的相应质量数据能得到一些具体物质信息。
(2)你这里的2级,3级不知道是不是指MSn,而根据你的目的可能是指:液相上对应的不同时间段(保留时间)在质谱上对应不同物质的分子量
(3)分离,定性么!
努力奋斗!!!
3楼2011-04-21 18:18:20
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蓝色柳

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by JLU_chem_man at 2011-04-21 18:06:33:
液质联用之前,首先要做的就是单独在液相上寻找合适的条件和参数使得在液相条件下完成分离并通过液相的检测器(紫外,荧光等)分辨出组分的多少。
而液质联用,质谱在某种程度上而言,扮演着检测器的作用,即在液 ...

谢谢,我没有做过质谱,我想知道在我这种是未知物质混合物的情况下,做液质是否可以对这里面多种组分分别定性,就是做出液质后可以大体的知道这几种组分分别是什么?
4楼2011-04-21 18:34:52
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jiusjiu

木虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

蓝色柳(金币+15): 2011-04-22 14:36:34
引用回帖:
Originally posted by 蓝色柳 at 2011-04-21 18:34:52:
谢谢,我没有做过质谱,我想知道在我这种是未知物质混合物的情况下,做液质是否可以对这里面多种组分分别定性,就是做出液质后可以大体的知道这几种组分分别是什么?

楼主的样品很可能含有蛋白等大分子,这个直接用液质检测可能会出现问题的。首先要根据文献明确一点这个样品中大概的情况,或者楼主的目的到底是想知道发酵液中的小分子还是大分子?
如果是小分子,沉淀蛋白后直接做液质,结合文献,紫外以及二级碎片大概能弄清楚其中的一些组分。
如果是大分子,那么最好酶解后,进行肽解析和搜库也大体能知道一些蛋白成分
5楼2011-04-22 10:56:50
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