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wangchunling

金虫 (小有名气)

[交流] 这样做胶回收可以吗 已有7人参与

pcr之后的琼脂糖胶,直接把目的条带切下来放在90多度热水中过5分钟左右,然后吸取上层溶液做纯化连接可以吗?
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

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★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+3): 感谢分享经验 2011-04-21 23:24:36
你用这种方法回收了,跑个电泳看看,怎么样
如果电泳液是TAE的话,盐应该不是问题
这边有人喜欢把胶切了过个柱子,高速离心五分钟,胶里的水全部留到下边的管子里
然后浓缩一下,结果还挺好的
11楼2011-04-21 22:37:30
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-04-21 15:45:44
不可以,你本身配琼脂糖的缓冲液里是含盐的,还有琼脂糖,这些都会影响连接酶的效率,最好还是用胶回收试剂盒回收吧
在等待中涅槃重生
2楼2011-04-21 11:40:48
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(金币+4): 给不给你epi呢 2011-04-21 15:46:07
楼主这方法哪来的?我是没听说过呢。
我只听说过用试剂盒胶回收的,孤陋寡闻了……
个人认为“90多度热水中过5分钟”并不能使琼脂糖胶融化,估计DNA出不来的。
楼主的方法如果有人用过也做得出来,不如分享下详细步骤哈,至少偶很感兴趣,嘿嘿
3楼2011-04-21 11:48:21
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wangchunling

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-04-21 11:48:21:
楼主这方法哪来的?我是没听说过呢。
我只听说过用试剂盒胶回收的,孤陋寡闻了……
个人认为“90多度热水中过5分钟”并不能使琼脂糖胶融化,估计DNA出不来的。
楼主的方法如果有人用过也做得出来,不如分享下详 ...

这是我的老师告诉我的方法,他说,在90多度的时候dna变性,单链dna就会跑到溶液里了……但我还没做成功……
4楼2011-04-21 14:34:05
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