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多糖纯化
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最近我拿到了一些70%的粗多糖,但仍需进一步纯化,有几个问题想请教一下: 1、粗多糖中的杂质可能有哪些成分; 2、若想检验粗多糖中是否含有蛋白质,是否只需看它在280nm处有没有吸收峰即可; 3、我只需纯化,不需分离,是否不需要用到DEAE或者葡聚糖之类的生化试剂柱层析,我只用有机溶剂多次沉淀,离心、分离,是否可以达到纯化的目的(生化试剂实在是太贵啊 );谢谢了 |
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2楼2006-09-08 19:29:56
kevin1117cn
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3楼2006-09-08 22:31:16
kevin1117cn
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xjlove(金币+1):呵呵,非常感谢,真想再送几个金币:)
killl(金币+1):感谢参与应助,请多支持求助板块。
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粗多糖里一般含有单糖,蛋白质,其他还原糖之类的,如果你要纯化,加入85% 乙醇l00ml于60℃浸提30min, 3000r/min离心20分钟,离心弃上清液,重复二次以去除单糖,双糖,低聚糖等干扰性成分。然后沉淀加200 ml蒸馏水95℃浸提120min,离心取上清液,定容至250 ml备用。 这样可以达到纯化的目的,或者用85%的乙醇,你也可以抽提,可能比浸提效果更好。 去除蛋白质可以用氯仿和丙酮交替洗涤,至于是不是看峰偶就不清楚了。 更好的纯化方法是利用凝胶色谱,可以按分子大小分出来的 |
5楼2006-09-08 23:11:46
yhyh96
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