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xjlove

银虫 (小有名气)

[交流] 多糖纯化

最近我拿到了一些70%的粗多糖,但仍需进一步纯化,有几个问题想请教一下:
1、粗多糖中的杂质可能有哪些成分;
2、若想检验粗多糖中是否含有蛋白质,是否只需看它在280nm处有没有吸收峰即可;
3、我只需纯化,不需分离,是否不需要用到DEAE或者葡聚糖之类的生化试剂柱层析,我只用有机溶剂多次沉淀,离心、分离,是否可以达到纯化的目的(生化试剂实在是太贵啊);
     谢谢了

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sunnyant

铁虫 (初入文坛)

★ ★
xjlove(金币+1):呵呵,非常感谢,真想再送几个金币:)
killl(金币+1):感谢参与应助,请多支持求助板块。
粗多糖里一般含有单糖,蛋白质,其他还原糖之类的,如果你要纯化,加入85% 乙醇l00ml于60℃浸提30min, 3000r/min离心20分钟,离心弃上清液,重复二次以去除单糖,双糖,低聚糖等干扰性成分。然后沉淀加200 ml蒸馏水95℃浸提120min,离心取上清液,定容至250 ml备用。
这样可以达到纯化的目的,或者用85%的乙醇,你也可以抽提,可能比浸提效果更好。
去除蛋白质可以用氯仿和丙酮交替洗涤,至于是不是看峰偶就不清楚了。
更好的纯化方法是利用凝胶色谱,可以按分子大小分出来的
5楼2006-09-08 23:11:46
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c123d123

铜虫 (正式写手)

这个问题我无能为力,但还是顶以下。希望别人能给好的解答!
2楼2006-09-08 19:29:56
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kevin1117cn

木虫 (小有名气)

你可以试试过柱,还有到孔树脂等等,我们实验室有人做,明天帮你问问
3楼2006-09-08 22:31:16
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kevin1117cn

木虫 (小有名气)

★ ★
xjlove(金币+2):谢谢了,试试看先:)
刚刚帮你问了,用异丙醇和氯仿混合处理,然后双氧水脱色,不过最好看看文献,他说这样得到的产物很少,只能帮你这么多了
4楼2006-09-08 22:36:06
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