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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】酶标仪测出的平行数据，出奇的一致
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日月流枫

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】酶标仪测出的平行数据，出奇的一致

各位大师 有谁遇到过相同的问题。我用96孔板做测试，周围为空白对照，里面六行每三行为一种物质，在反应完毕之后测OD420，发现六行数值都一样，而周围的没有这种情况。
求助！为什么数值会这么一致，在反应前测OD600还没有这种情况的
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1楼 2011-04-10 12:22:05
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看天

木虫 (知名作家)
日月流枫(金币+1): 谢谢你的认真回复 2011-04-10 17:59:56
引用回帖:
Originally posted by 日月流枫 at 2011-04-10 12:22:05:
各位大师 有谁遇到过相同的问题。我用96孔板做测试，周围为空白对照，里面六行每三行为一种物质，在反应完毕之后测OD420，发现六行数值都一样，而周围的没有这种情况。
求助！为什么数值会这么一致，在反应前测O ...

你之前测过420nm的吗？！
出现过这样的情况吗
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2楼2011-04-10 13:18:02
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)
★ ★
日月流枫(金币+1): 2011-04-10 18:17:30
看天(金币+2): 一仪器问题吧 2011-04-10 18:26:04
引用回帖:
Originally posted by 日月流枫 at 2011-04-10 12:22:05:
各位大师 有谁遇到过相同的问题。我用96孔板做测试，周围为空白对照，里面六行每三行为一种物质，在反应完毕之后测OD420，发现六行数值都一样，而周围的没有这种情况。
求助！为什么数值会这么一致，在反应前测O ...

绝不会发生这种情况滴，
肯定是哪儿你搞错了。

1）是不是灯坏了？
2）你今天去买彩票吧。
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3楼2011-04-10 14:51:43
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guoyl

木虫 (小有名气)
日月流枫(金币+1): 2011-04-10 18:15:08
可能漏加了一些反应液，如没有的话，你是实验高手，祝贺你
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4楼2011-04-10 16:06:32
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天使托

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★
日月流枫(金币+1): 谢谢 2011-04-10 18:14:13
看天(金币+3): d对 仪器本身的问题除外没有问题 2011-04-10 18:25:38
1：这种结果太奇怪了，数据有几个是相等的还可以理解，但是全部一样就有问题了，你看看你的软件是不是有问题呢？或者就是灯有问题！
2：可以切换别的波长试试！
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5楼2011-04-10 16:12:10
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日月流枫

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 看天 at 2011-04-10 13:18:02:
你之前测过420nm的吗？！
出现过这样的情况吗

以前测得是不一样，最近做的几个样，都是这样，每一列中间那六个相同，各列之间不同
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6楼2011-04-10 18:13:51
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日月流枫

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-04-10 16:12:10:
1：这种结果太奇怪了，数据有几个是相等的还可以理解，但是全部一样就有问题了，你看看你的软件是不是有问题呢？或者就是灯有问题！
2：可以切换别的波长试试！

恩 试试
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7楼2011-04-10 18:14:27
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日月流枫

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by guoyl at 2011-04-10 16:06:32:
可能漏加了一些反应液，如没有的话，你是实验高手，祝贺你

漏加反应液也不至于会让结果这么一致吧？？最后需要测得物质，不是只有反应完全才会出现吗
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8楼2011-04-10 18:16:15
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)
日月流枫(金币+2): 非常感谢 2011-07-18 09:59:32
引用回帖:
Originally posted by 日月流枫 at 2011-04-10 12:22:05:
各位大师 有谁遇到过相同的问题。我用96孔板做测试，周围为空白对照，里面六行每三行为一种物质，在反应完毕之后测OD420，发现六行数值都一样，而周围的没有这种情况。
求助！为什么数值会这么一致，在反应前测O ...

问题可能还是有三种：
1.显色底物的激发波长是不是420，要是测得不敏感波长，是极容易出现这现象的;
2.试一试添加一个额外的不敏感的参考波长来去除额外因素的影响，如可以试试OD420+OD650.。。。;
3.会不会由于某些原因导致显色底物不工作了,可以检查一下最近的实验记录，有没有什么变化

祝你好运
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9楼2011-04-11 09:05:36
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apheyh

银虫 (小有名气)
日月流枫(金币+1): 恩 谢谢 感觉这个可能性比较大哦 2011-04-12 13:36:35
日月流枫(金币+1): 2011-04-12 13:36:42
个人经验觉得，肯定是出现问题了；应该是机器的滤光片出现问题。简易检修机器！
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10楼2011-04-11 09:44:17
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日月流枫

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by apheyh at 2011-04-11 09:44:17:
个人经验觉得，肯定是出现问题了；应该是机器的滤光片出现问题。简易检修机器！

恩 尤其是我最近做的一个结果，测了两个OD420，同样的三个孔，两次数据差别好大，例如，有一列数第一次测，分别为4.239、4.599和4.388，后来都变成了5.979。
滤光片，可以自己修吗，还是要找人维修？
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11楼2011-04-12 13:46:35
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apheyh

银虫 (小有名气)
肯定是要找人修了，而且滤光片很贵的，前段时间我们的酶标仪换了一套滤光片，花了1.5w。
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12楼2011-04-12 14:17:17
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