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【求助/交流】类囊体膜蛋白跑SDS-urea-PAGE的具体方法
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最近试验要做一个拟南芥类囊体膜蛋白的Western-Blot,看了好多文献说是跑SDS-urea-PAGE效果要好一些,我不知道原理是什么,我试着跑了两次效果不好主要问题:如果按照正常的SDS-PAGE配方佩15%的分离胶10ml含6M尿素,加尿素固体的话最后总的体积要大于10ml ,即便将配方中的水去掉直接加尿素固体,最后总体积仍然大于10ml,跑完染色后效果还不如正常的点用效果好。我想知道为什么做囊体膜蛋白的Western-Blot为什么要跑SDS-urea-PAGE配制电泳?如果跑SDS-urea-PAGE配制电泳尿素怎么处理,直接加固体还是配到Tris-HCl里面或者Arc-Bis里面?还望经验丰富的老师帮忙解答一下,万分感谢!! [ Last edited by feitiannongying on 2011-4-9 at 18:50 ] |
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