| 查看: 4720 | 回复: 19 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助】小麦籽粒中蔗糖-淀粉转化过程中关键酶活性测定
|
|||
| 请问有没有哪位做过小麦籽粒中蔗糖-淀粉转化过程中关键酶（SS、SPS、ADPG-PPase、UDPG-PPase、SSS、GBSS）活性的测定。 求方法。 |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
baqs1234» 猜你喜欢
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有74人回复
-
岩土工程学报什么时候才能终审完呐
已经有4人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有25人回复
-
2027广东省杰青
已经有6人回复
-
快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。
已经有3人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有9人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有26人回复
-
我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人
已经有16人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有12人回复
-
招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 大家都说说，自己面试过程中，遇到过的最难忘/最夸张/无厘头的面试问题？
已经有39人回复
- 【求助】原油能做四组份含量测定吗？
已经有15人回复
- 乳液聚合中如何提高转化率
已经有14人回复
- 药物钯残留的测定
已经有6人回复
- 薄膜的反射性和透明性测定
已经有15人回复
- 水质中钙镁测定
已经有18人回复
- 硝酸盐测定预处理
已经有7人回复
- 实验过程中对水蒸气冷凝的方法？
已经有6人回复
- 采用共沉淀法，如何测定是否形成固溶体
已经有7人回复
- 微生物如何利用葡萄糖 蔗糖 还有淀粉
已经有3人回复
- 碘量法测定淀粉酶活性的问题
已经有14人回复
- 急求！！植物叶片中硝酸还原酶、谷酰胺合成酶、天门冬酰胺合成酶活性的测定方法
已经有10人回复
- 【求助】求助关于土壤蛋白酶和蔗糖酶测定所遇到的问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】【土壤酶】蔗糖酶测定方法中苯甲酸的配制
已经有15人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
2026年财务管理、经济与信息技术国际会议 (FMEIT 2026)
+1/605
-
期待你的到来
+1/373
-
西安交大马伟/王亚洲课题组诚聘联培博士和硕士学生多名-有机生物电子学方向
+1/183
-
东南大学杰青/海优团队招聘催化方向博士后
+1/81
-
广西大学 化学化工学院 新入职教师招生 化学、化学工程与技术、材料化工专业
+1/48
-
中国科大-合肥国家实验室冷原子量子网络团队招聘启事
+2/40
-
广东医科大学博士后招聘-基础医学，生信等方向
+1/38
-
加拿大/英属哥伦比亚大学曹彦凯课题组招收博后 [机器人/控制方向]
+1/34
-
天津大学环境学院童银栋教授招收博士后（生源要素循环/温室效应/新污染物方向）
+1/30
-
2026年生物学、大数据与信息工程国际会议 (BSBIE 2026)
+1/29
-
祈福！
+1/25
-
祝福！祈福！！基金中中中！
+5/15
-
河海大学海洋环境污染与生态毒理学研究组招收2027级硕士生 及博士研究生
+1/9
-
北京理工大学-集成电路与电子学院杰青团队-招博士后
+1/7
-
西安交通大学杜宝吉课题组招收申请考核制博士生
+2/6
-
27推免-广州医科大学封红亮教授招收精神医学应用心理学推免生
+1/5
-
UTS 招收2027年入学博士生
+1/3
-
海南大学化学院-科研助理招聘 （可读博，可与华中科技大学，天津大学联培）+博后招聘
+1/2
-
海南大学化学院—功能分子器件团队2027博士招生+博士后招聘
+1/2
-
招聘要求 有机合成，应届硕士或者博士
+1/2
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
|
大田实验在开花期挂牌标记生长一致且同日开花的麦穗，花后每隔5天取样，每次15穗，取其剑叶和籽粒，经液氮速冻后，置于-40℃冰箱保存，用于腺苷二磷酸葡糖糖焦磷酸化酶（AGPP）、可溶性淀粉合成酶（SSS）、束缚态淀粉合成酶（GBSS）的测定。另取15穗，分离籽粒置于烘箱中105℃杀青30min，然后80℃烘干称重，籽粒经微型高速万能粉碎机粉碎后，用于蔗糖、可溶性总糖、淀粉及其组分含量的测定。 蔗糖含量的测定采用间苯二酚法，可溶性总糖含量的测定采用蒽酮比色法。 取20个籽粒，加4ml提取液（含100mmol/L Tricine—NaOH（PH=7.5），8mmol/LMgCl2，2mmol/LEDTA，12.5%（V/V）甘油，1%（W/V）PVP—40，50mmol/L2—巯基乙醇），磨成匀浆，在10000×g离心30min，然后收集上清液置于冰浴，作为粗酶液备用。沉淀用1ml提取液洗涤两次，然后悬浮于2ml的提取介质中，用与GBSS活性测定。 AGPP活性测定：取20µl酶粗提取加入110µl反应液中（反应液最终浓度是100mmol/LHEPES—NaOH（PH=7.4）、1.2mmol/LADPG，3mmol/LPPi，5mmol/L MgCl2，4mmol/LDTT），30℃反应20min后，沸水中终止反应30s，10000×g，10min，取上清液100µl加5.2µl比色液（5.76mmol/LNADP，0.08unitP—glucomutase（磷酸葡萄糖变位酶），0.07unitG6P—脱氢酶）。30℃反应10min后，测定340nmOD值。根据OD值的增加量计算ADPG焦磷酸化酶的活力，单位为nmol/1000seeds min，以20µl煮沸的粗酶液作为对照。 SSS、GBSS活性的测定：取20µl酶粗提取液加入36µl反应液Ⅰ（反应液最终浓度为50mmol/LHEPES—NaOH（PH=7.4）、1.6mmol/LADPG、0.7mg支链淀粉、15mmol/LDTT），30℃反应20min后，沸水中终止反应30s，冰浴中冷却；加20µl反应液Ⅱ（含50mmol/LHEPES—NaOH（PH=7.4）、4mmol/LPEP、200mmol/LKCl、10mmol/LMgCl2、1.2unit丙酮酸激酶），30℃反应20min后，沸水中终止反应30s，10000×g离心10min。取上清液60µl与43µl反应液Ⅲ（50mmol/LHEPES—NaOH（PH=7.4）、10mmol/L葡萄糖、20mM MgCl2、2mmol/LNADP、1.4unit己糖激酶、0.35unit G6P—脱氢酶），30℃反应10min后，测定340nmOD值的变化，单位为nmol/1000seeds min，以20µl煮沸的粗酶液作为对照。 希望对你有所帮助，呵呵 |
11楼2011-12-04 16:22:09
2楼2011-04-07 14:47:57
3楼2011-04-07 16:08:15
4楼2011-04-07 16:34:58
