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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】分析 液相 双峰
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会菲的石头

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】分析 液相 双峰

大家有没有走过芦丁的乙醇配的液相呢？

我用的流动相是甲醇和水，检测波长是257nm。用纯的乙醇、各种比例的乙醇配制芦丁对照品，只有30%和40%的乙醇、纯水走出来是单峰，其他的液体配的芦丁对照液走出来之后都是双峰的，这是为什么呢？

PS：已经排除是溶剂的原因了，用乙醇走的时候是没有峰的。
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1楼2011-04-06 18:17:43
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xingyunxing

金虫 (正式写手)
★
novus(金币+1): 鼓励一下吧。欢迎常来药学版！ http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=2902523 看看版规就知道怎么发求助了! 2011-04-06 19:25:40
能问你一下怎么发求助帖呢？
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3楼2011-04-06 18:46:37
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novus

铁杆木虫 (著名写手)
★
wtf66(金币+1): 谢谢参与 2011-04-06 22:17:00
会菲的石头(金币+1): 2011-04-07 11:09:11
会菲的石头(金币+1): 非常谢谢 2011-04-07 11:09:41
芦丁的极性比较大，如果用小极性的溶剂溶解而且起始流动相的极性比较大的时候，进到HPLC里面容易有溶剂效应，也就是说用小极性溶剂溶解的样品进到HPLC的时候溶质会在样品溶液和流动相中再次分配，于是色谱峰会展宽，导致出现双峰的情况出现。
建议楼主用流动相溶解样品或者减少进样量。
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2楼2011-04-06 18:38:30
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luojin7653

银虫 (正式写手)
★
wtf66(金币+1): 谢谢参与 2011-04-06 22:17:14
纯水很多东西洗不下来，还有不知道楼主做完冲柱子没..
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4楼2011-04-06 20:56:29
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yuyang031985

金虫 (正式写手)
★
wtf66(金币+1): 谢谢参与 2011-04-06 22:17:26
引用回帖:
Originally posted by novus at 2011-04-06 18:38:30:
芦丁的极性比较大，如果用小极性的溶剂溶解而且起始流动相的极性比较大的时候，进到HPLC里面容易有溶剂效应，也就是说用小极性溶剂溶解的样品进到HPLC的时候溶质会在样品溶液和流动相中再次分配，于是色谱峰会展宽 ...

这位虫友分析的有道理。试试用流动相配置标准品做。

最好附上图，看下双峰的位置，这样就更直观了解你的情况

[ Last edited by yuyang031985 on 2011-4-6 at 22:14 ]
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5楼2011-04-06 22:12:37
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