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【求助】分析 液相 双峰
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会菲的石头
新虫
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[交流]
【求助】分析 液相 双峰
大家有没有走过芦丁的乙醇配的液相呢?
我用的流动相是甲醇和水,检测波长是257nm。用纯的乙醇、各种比例的乙醇配制芦丁对照品,只有30%和40%的乙醇、纯水走出来是单峰,其他的液体配的芦丁对照液走出来之后都是双峰的,这是为什么呢?
PS:已经排除是溶剂的原因了,用乙醇走的时候是没有峰的。
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2011-04-06 18:17:43
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novus
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wtf66(金币+1): 谢谢参与 2011-04-06 22:17:00
会菲的石头(金币+1): 2011-04-07 11:09:11
会菲的石头(金币+1): 非常谢谢 2011-04-07 11:09:41
芦丁的极性比较大,如果用小极性的溶剂溶解而且起始流动相的极性比较大的时候,进到HPLC里面容易有溶剂效应,也就是说用小极性溶剂溶解的样品进到HPLC的时候溶质会在样品溶液和流动相中再次分配,于是色谱峰会展宽,导致出现双峰的情况出现。
建议楼主用流动相溶解样品或者减少进样量。
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2楼
2011-04-06 18:38:30
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xingyunxing
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novus(金币+1): 鼓励一下吧。欢迎常来药学版! http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=2902523 看看版规就知道怎么发求助了! 2011-04-06 19:25:40
能问你一下怎么发求助帖呢?
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3楼
2011-04-06 18:46:37
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luojin7653
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wtf66(金币+1): 谢谢参与 2011-04-06 22:17:14
纯水很多东西洗不下来,还有不知道楼主做完冲柱子没..
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4楼
2011-04-06 20:56:29
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yuyang031985
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wtf66(金币+1): 谢谢参与 2011-04-06 22:17:26
引用回帖:
Originally posted by
novus
at 2011-04-06 18:38:30:
芦丁的极性比较大,如果用小极性的溶剂溶解而且起始流动相的极性比较大的时候,进到HPLC里面容易有溶剂效应,也就是说用小极性溶剂溶解的样品进到HPLC的时候溶质会在样品溶液和流动相中再次分配,于是色谱峰会展宽 ...
这位虫友分析的有道理。试试用流动相配置标准品做。
最好附上图,看下双峰的位置,这样就更直观了解你的情况
[
Last edited by yuyang031985 on 2011-4-6 at 22:14
]
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5楼
2011-04-06 22:12:37
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会菲的石头
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谢谢大家呢
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2011-04-07 16:07:08
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引用回帖:
Originally posted by
会菲的石头
at 2011-04-06 18:17:43:
大家有没有走过芦丁的乙醇配的液相呢?
我用的流动相是甲醇和水,检测波长是257nm。用纯的乙醇、各种比例的乙醇配制芦丁对照品,只有30%和40%的乙醇、纯水走出来是单峰,其他的液体配的芦丁对照液走出来之后都 ...
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7楼
2011-04-10 13:55:37
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limingstone
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强人啊
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