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【求助/交流】质粒的单链处理
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有没有做过基因敲除的朋友,在处理自杀质粒时用过这个方法:取2ug自杀质粒溶于20uL0.2mo1/L NaOH溶液中(含0.2mmo1/L,EDTA), 37度孵育30min。加入2ul乙酸钠(3mo1/L, PH 4.8), 80ul无水乙醇,-70 度沉淀质粒DNA, 70%乙醇洗涤沉淀两次,真空干燥。而后溶于10ul灭菌去离子水中,冰浴2小时,-20 度保存备用。 如果有,我想请教一下,在用NaOH处理后,是否需要离心收集沉淀,再加乙酸钠,还是不离心,直接加?谢谢 |
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1/10体积加当然是不离心啊。