应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台» 学术交流区» 论文翻译 » 论文翻译求助完结子版 » 几段中文翻译成英文 急求呀 拜托大家帮帮忙
51/1返回列表
查看: 3791  |  回复: 6
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 翻译EPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

supergreen

木虫 (小有名气)

[交流] 几段中文翻译成英文 急求呀 拜托大家帮帮忙

1 细胞培养及分组
MCM4201完全培养基常规培养HMCs，置于37℃、饱和湿度5%CO2的孵箱内贴壁传代培养，隔日换液,0.25%胰酶3~4天消化、传代。取6~9代对数生长期细胞，以每孔3~5×105个细胞接种6孔板中，培养细胞待其贴壁融合70%~80%后用无血清Opti-MEM培养基同步化24h，用于RNA转染及不同环境下继续培养。
2、siRNA合成与转染
根据GenBank数据库提供的人SAA全长基因(GenBank Acc. No. NM_001664.2)由美国Invitrogen公司设计合成RNAi的siRNA，SAA-siRNA：5′-GCUCAGACAAAUACUUCCAUGCUCG-3′；HMCs共分7组：（1）正常对照组（NG，含葡萄糖5.5mmol/L）；（2）高糖组（HG，含葡萄糖30mmol/L）；(3)等渗对照组（Man+ NG，含5.5mM葡萄糖及24.5mM的甘露醇）；(4) 波动糖组（FG, 含葡萄糖30mmol/L与含葡萄糖5.5mmol/L MCM培养基每4小时交替培养）；（5）高糖+脂质体对照组（HG+Lipo）；（6）高糖+阴性转染对照组（HG+negative-siRNA）；(7) 高糖+SAA-siRNA组（HG+SAA-siRNA）。以绿色荧光蛋白（Green fluorescent protein, GFP）标记的siRNA做对照，转染48h后在荧光倒置显微镜下观察GFP的表达，计算转染效率。脂质体瞬时转染方法严格按照Lipofectamine?2000说明书进行。于0h、12h、24h、48h末收集各组细胞上清。
3 、总RNA提取及cDNA的合成
各组分别作用48h后按5×106～1×107个细胞加1ml TRIzol低温吹打，后续操作按Trizol说明书进行，最后用DEPC处理的超纯水溶解RNA，60℃孵育5 min，1%琼脂糖凝胶电泳检测其完整性，分光光度计测定其纯度和浓度。cDNA合成的反应体系按照试剂盒进行：① 5×PrimeScriptTM Buffer（for Real Time） 4 μl; ② PrimeScriptTM RT Enzyme Mix I 1μl;③ Oligo dT Primer（50 μM）1μl;④Random 6 mers（100 μM）1μl;⑤ Total RNA 1μg;⑥ 加RNase Free dH2O至20μl反应体系。反转录反应条件：37℃，15min；85℃，15s反转录成cDNA。
4 、实时定量PCR
采用SYBRGreen嵌合荧光进行反应，按说明书配制25μl的反应体系，①SYBR? Premix Ex TaqTM II（2×）12.5 μl；②PCR Forward Primer（10 μM）1μl；③PCR Reverse Primer（10 μM）1μl； ④模板（cDNA溶液）2μl；⑤dH2O 8.5 μl。阴性对照组加入未反转录的RNA作为模板。上下游引物均由大连宝生物工程有限公司（Takara）设计合成(表1)，反应条件如下：95℃预变性30s，95℃变性5s，58~62℃退火20s，72℃延伸30s同时获取荧光，共40个循环，后行产物的溶解曲线分析, 得到样品量的参数Ct值(循环阈值)。以2-ΔΔCt 表示基因的相对表达量，ΔΔCt=[Ct(待测基因)-Ct(GAPDH)]试验组-[Ct(待测基因)-Ct(GAPDH)]对照组。

5 、ELISA法检测细胞上清液中FN、SAA、TNF蛋白的含量
     取不同处理因素作用0h、12h、24h、48h的细胞上清液，无菌管收集，6000转，4℃，离心10分钟，仔细收集上清，后续操作按ELISA试剂盒说明书进行，在酶标仪450nm波长处，以空白对照孔调零，直接测定吸光值，并由标准曲线公式换算成各蛋白的浓度值。
6、 数据分析
      所有数据以 表示，采用SPSS 17.0统计分析软件，组间比较采用单因素方差分析，组内两两比较采用LSD, Dunnett’s T3，P＜0.05为差异有统计学意义。

[ Last edited by Mally89 on 2011-4-5 at 15:04 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2011-03-30 10:29:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

supergreen

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by seaharrier at 2011-03-30 10:37:17:
几段英文翻译成中文？

啊啊啊我错了 说反了 中文翻译成英文呀~抓狂
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-30 10:49:37
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

seaharrier

铁杆木虫 (知名作家)
几段英文翻译成中文？
赞一下 回复此楼
2楼2011-03-30 10:37:17
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jwdxbjzh

至尊木虫 (职业作家)
！已经为中文了，故如下：
1 细胞培养及分组
MCM4201完全培养基常规培养HMCs，置于37℃、饱和湿度5%CO2的孵箱内贴壁传代培养，隔日换液,0.25%胰酶3~4天消化、传代。取6~9代对数生长期细胞，以每孔3~5×105个细胞接种6孔板中，培养细胞待其贴壁融合70%~80%后用无血清Opti-MEM培养基同步化24h，用于RNA转染及不同环境下继续培养。
2、siRNA合成与转染
根据GenBank数据库提供的人SAA全长基因(GenBank Acc. No. NM_001664.2)由美国Invitrogen公司设计合成RNAi的siRNA，SAA-siRNA：5′-GCUCAGACAAAUACUUCCAUGCUCG-3′；HMCs共分7组：（1）正常对照组（NG，含葡萄糖5.5mmol/L）；（2）高糖组（HG，含葡萄糖30mmol/L）；(3)等渗对照组（Man+ NG，含5.5mM葡萄糖及24.5mM的甘露醇）；(4) 波动糖组（FG, 含葡萄糖30mmol/L与含葡萄糖5.5mmol/L MCM培养基每4小时交替培养）；（5）高糖+脂质体对照组（HG+Lipo）；（6）高糖+阴性转染对照组（HG+negative-siRNA）；(7) 高糖+SAA-siRNA组（HG+SAA-siRNA）。以绿色荧光蛋白（Green fluorescent protein, GFP）标记的siRNA做对照，转染48h后在荧光倒置显微镜下观察GFP的表达，计算转染效率。脂质体瞬时转染方法严格按照Lipofectamine?2000说明书进行。于0h、12h、24h、48h末收集各组细胞上清。
3 、总RNA提取及cDNA的合成
各组分别作用48h后按5×106～1×107个细胞加1ml TRIzol低温吹打，后续操作按Trizol说明书进行，最后用DEPC处理的超纯水溶解RNA，60℃孵育5 min，1%琼脂糖凝胶电泳检测其完整性，分光光度计测定其纯度和浓度。cDNA合成的反应体系按照试剂盒进行：① 5×PrimeScriptTM Buffer（for Real Time） 4 μl; ② PrimeScriptTM RT Enzyme Mix I 1μl;③ Oligo dT Primer（50 μM）1μl;④Random 6 mers（100 μM）1μl;⑤ Total RNA 1μg;⑥ 加RNase Free dH2O至20μl反应体系。反转录反应条件：37℃，15min；85℃，15s反转录成cDNA。
4 、实时定量PCR
采用SYBRGreen嵌合荧光进行反应，按说明书配制25μl的反应体系，①SYBR? Premix Ex TaqTM II（2×）12.5 μl；②PCR Forward Primer（10 μM）1μl；③PCR Reverse Primer（10 μM）1μl； ④模板（cDNA溶液）2μl；⑤dH2O 8.5 μl。阴性对照组加入未反转录的RNA作为模板。上下游引物均由大连宝生物工程有限公司（Takara）设计合成(表1)，反应条件如下：95℃预变性30s，95℃变性5s，58~62℃退火20s，72℃延伸30s同时获取荧光，共40个循环，后行产物的溶解曲线分析, 得到样品量的参数Ct值(循环阈值)。以2-ΔΔCt 表示基因的相对表达量，ΔΔCt=[Ct(待测基因)-Ct(GAPDH)]试验组-[Ct(待测基因)-Ct(GAPDH)]对照组。

5 、ELISA法检测细胞上清液中FN、SAA、TNF蛋白的含量
     取不同处理因素作用0h、12h、24h、48h的细胞上清液，无菌管收集，6000转，4℃，离心10分钟，仔细收集上清，后续操作按ELISA试剂盒说明书进行，在酶标仪450nm波长处，以空白对照孔调零，直接测定吸光值，并由标准曲线公式换算成各蛋白的浓度值。
6、 数据分析
      所有数据以 表示，采用SPSS 17.0统计分析软件，组间比较采用单因素方差分析，组内两两比较采用LSD, Dunnett’s T3，P＜0.05为差异有统计学意义。

Keywords: 细胞培养  SiRNA  PCR
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-03-30 10:38:55
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

supergreen

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jwdxbjzh at 2011-03-30 10:38:55:
！已经为中文了，故如下：
1 细胞培养及分组
MCM4201完全培养基常规培养HMCs，置于37℃、饱和湿度5%CO2的孵箱内贴壁传代培养，隔日换液,0.25%胰酶3~4天消化、传代。取6~9代对数生长期细胞，以每孔3~5×105个细 ...

我说反啦反啦反啦=。= 中文翻译成英文啦 还望帮帮忙啊！
赞一下 回复此楼
5楼2011-03-30 10:51:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭