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鸟瞰世界

新虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】质粒测序测不到克隆位点已有9人参与

用pMD18-T载体构建的质粒，菌液测序，结果不仅没测到PCR目的片段，连克隆位点的接头序列都测不到，为什么呢？很迷惑啊！

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1楼 2011-03-21 08:31:46

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amilie030312

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★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-04-02 08:11:55

引用回帖:

Originally posted by 鸟瞰世界 at 2011-03-21 13:11:09:
载体自连接头序列也不会丢失吧？

如果酶里面有核酸外切酶的污染那么片段末端就会损失掉几个碱基，然后再自连上之后测序就会发现载体序列有，但没目的序列而且还没有接头。

赞一下(2人)

14楼2011-03-31 13:49:22

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查看全部 17 个回答

zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔

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送测之前酶切了吗？

一直向前！

3楼2011-03-21 12:45:00

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amilie030312

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★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-03-21 15:05:53

载体可能自连了吧，酶里面可能有核酸外切酶污染

赞一下(1人)

4楼2011-03-21 12:47:20

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鸟瞰世界

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by sfb1020 at 2011-03-21 11:52:25:
重测

重测了还是一样啊

5楼2011-03-21 13:09:33

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