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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大家有用到过什么过表达的载体吗？需要诱导剂诱导吗？
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

[交流] 【求助/交流】大家有用到过什么过表达的载体吗？需要诱导剂诱导吗？ 已有4人参与

最近在做几个基因的过表达，可是就是没有任何反应，载体和基因没有任何问题，连接也没有问题，方向什么都考虑了，可是为什么转到菌里面就是没有反应呢？

载体为PAK1900

不知道大家在用过表达的载体做互补或者过表达时需要加诱导剂吗？是不是需要诱导才可以进行表达啊？

求教求教啊！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
1楼 2011-03-19 22:16:57
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-20 22:09:50:
谢谢了！

祝顺利！
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jiayoubashaonian
13楼2011-03-20 22:42:48
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
楼主转到大肠杆菌吗？我们常用的是pet28a，PMAL,PGEX-4T-1，感觉还可以的！
赞一下 回复此楼
jiayoubashaonian
2楼2011-03-19 22:21:40
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
引用回帖:
Originally posted by blackrose8089 at 2011-03-19 22:21:40:
楼主转到大肠杆菌吗？我们常用的是pet28a，PMAL,PGEX-4T-1，感觉还可以的！

是转到我们的宿主菌里面，绿脓杆菌，你用的过量表达的载体需要诱导剂诱导吗？
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-03-19 22:54:16
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-19 22:54:16:
是转到我们的宿主菌里面，绿脓杆菌，你用的过量表达的载体需要诱导剂诱导吗？

是的，用IPTG,0.4mM就可以的，先试一下30度，100rpm，如果没戏，就换下载体和和感受态试一下！
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jiayoubashaonian
4楼2011-03-19 22:58:57
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