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[交流] 【求助/交流】JC-1检测线粒体膜电位时为何不必用最大激发和发射波长?

试剂盒上的说明


检测JC-1单体时可以把激发光设置为490nm,发射光设置为530nm;检测JC-1聚合物时,可以把激发光设置为525nm,发射光设置为590nm。

注意:此处测定荧光时不必把激发光和发射光设置在最大激发波长和最大发射波长。

如使用荧光显微镜观察,检测JC-1单体时可以参考观察其它绿色荧光时的设置,如观察GFP或FITC时的设置;检测JC-1聚合物时可以参考观察其它红色荧光,如碘化丙啶或Cy3时的设置。出现绿色荧光说明线粒体膜电位下降,并且该细胞很可能处于细胞凋亡早期。出现红色荧光说明线粒体膜电位比较正常,细胞的状态也比较正常。



为何不必用最大激发和发射波长?
荧光显微镜的话好理解一点,如果是荧光分光光度计呢?
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