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terry2156091

银虫 (小有名气)

[交流] 【共享】实验常用试剂、缓冲液的配制方法【已搜无重复】

实验常用试剂、缓冲液的配制方法


10楼有补充内容

[ Last edited by calledone on 2007-7-22 at 22:29 ]
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terry2156091

银虫 (小有名气)

补贴

电泳缓冲液、染料和凝胶加样液
电泳缓冲液
50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量
2mol/L Tris碱
1mol/L 乙酸
100 mmol/L EDTA
水  242g
57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)
200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
补足1L  

5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液
成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量
445 mmol/L Tris碱
445 mmol/L 硼酸盐
10 mmol/L EDTA
水  54g
27.5g 硼酸
20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
补足1L  

染料
1%溴酚蓝(bromophenol blue)
加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)
溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。
10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide)
小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。
凝胶上样液(gel loading solutions)
6×碱性凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.3 N 氢氧化钠
6 mmol/L EDTA
18%聚蔗糖(400型)
0.15%溴甲酚绿
0.25%二甲苯青FF
水  300ul 10N 氢氧化钠
120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
1.8g
15mg
25mg
补足到10ml  

6×聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚蓝
0.15%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA
15%聚蔗糖(400型)
水  1.5ml 1%溴酚蓝
1.5ml 1%二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
1.5g
补足到10ml  

6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.25%溴酚蓝
0.25%二甲苯青FF
15%聚蔗糖(400型)
水  2.5ml 1%溴酚蓝
2.5ml 1%二甲苯青FF
1.5g
补足到10ml  

6×甘油凝胶上样液(4℃贮存)
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚蓝
0.15%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA
50%甘油
水  1.5ml 1%溴酚蓝
1.5ml 1%二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
3ml
3.9ml  

6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚蓝
0.15%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA
40%聚蔗糖
水  1.5ml 1%溴酚蓝
1.5ml 1%二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
4g
补足到10ml  

10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.2%溴酚蓝
0.2%二甲苯青FF
200 mmol/L EDTA
0.1%SDS
50%甘油
水  20mg
20mg
4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
100ul 10% SDS
5ml
补足到10ml  
11楼2006-08-24 16:43:23
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terry2156091

银虫 (小有名气)

哭,还没人顶

这可是我自己总结的呀!
3楼2006-08-21 09:52:15
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理顺思路

铁虫 (初入文坛)

1

太强了。佩服!
5楼2006-08-21 14:12:35
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terui9979

1

太强了,以后不用老查了
12楼2006-08-27 19:35:11
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